一、犬瘟热的诊断与治疗（论文文献综述）
温慧明[1]（2020）在《大连市犬瘟热、犬细小病毒流行病学调查》文中指出本文收集2013年6月～2018年6月五年间大连市城区内（包括中山区、西岗区、沙河口区和甘井子区）犬瘟热病和犬细小病毒病这两类犬传染病的病例资料和诊断报告,对大连市城区内犬瘟热病和犬的细小病毒病这两类犬传染病流行情况进行监测调查分析,运用流行病学及防治调查分析的方法,统计大连市城区内犬瘟热和犬细小病毒病两类犬传染病的流行特征和流行趋势以及治疗方法,为犬传染病的预防控制措施提供科学的理论依据,为动物诊疗机构（包括动物诊所和动物医院）提供治疗犬瘟热病和犬的细小病毒病指导和借鉴。2013年6月～2018年6月期间,大连市城区内患有犬瘟热和犬细小病毒病两类犬传染病的病犬1659例,其中犬细小病毒病病1224例,年均就诊发病率14.8%;犬瘟热病435例,年均就诊发病率5.2%。本文通过流行病学及防治调查得出以下结果:1.犬细小病毒病发病率高于犬瘟热发病率,且五年间二者的发病率均有下降的趋势。2.犬细小病毒病和犬瘟热的发病与季节有关。经统计发现,每年4月开始发病数显着下降,5～10月份发病率较低,分别占全年发病总数的40.11%和39.77%,从11月份开始发病数逐渐上升,1～4月份和11～12月份发病数较高。3.犬细小病毒病例多发的行政区域是甘井子区和沙河口区,占所有患犬细小病毒病犬61.52%;犬瘟热病例主要分布于甘井子区,占所有患有犬瘟热病犬总数的49.20%。4.犬细小病毒病易感犬品种主要是贵兵犬、哈士奇、松狮犬,占比分别为17.40%、15.03%、17.24%;犬瘟热易感犬品种主要是吉娃娃、金毛犬、哈士奇,占比分别为21.84%、17.24%、14.71%。经统计发现,犬瘟热和犬细小病毒病纯种犬的发病率高于杂种犬。5.犬细小病毒病患病犬在小于1岁的犬中,以1～5月龄间的幼犬为发病主体,大于1岁的犬发病率较低;犬瘟热患病犬在小于1岁的犬中,以1月～6月龄间的幼犬为发病主体,大于1岁的犬发病率较低。6.从性别来看,公犬较母犬易感犬细小病毒病和犬瘟热。7.免疫犬发病数较未免疫犬的发病数低,且经人工被动免疫后的犬,发病后症状较轻,也易治愈。8.患有犬瘟热治愈率不高,存在愈后不良风险;犬细小病毒病的病犬死亡率低,治愈率较高。采用单克隆抗体治疗效果较好。
孙伟伟[2]（2020）在《犬瘟热病毒H蛋白单克隆抗体的制备及竞争ELISA检测方法的建立》文中认为犬瘟热（canine distemper,CD）是由犬瘟热病毒（canine distemper virus,CDV）感染引起的消化道、呼吸道、神经系统异常以及机体免疫抑制的传染性疾病。近年来,我国CD呈现出新的流行特点:毒株变异快、感染谱不断扩大、混合感染现象普遍,由其引发的免疫抑制致使疫苗免疫失败时有发生,对养犬业和毛皮动物养殖造成的直接及间接经济损失巨大,寻求防控该病已成为亟待解决的重大科学与生产实际问题。为此,本研究旨在了解江苏部分地区犬瘟热流行情况,分析病毒H蛋白的遗传变异规律,丰富了CDV流行毒株资源库;同时,扩充已建立的CDV单克隆抗体杂交瘤细胞株库,从中筛选具有广谱中和活性单克隆抗体;基于重组H蛋白和单克隆抗体建立CDV抗原与抗体竞争ELISA检测方法,用于CD病原学和血清学检测,为CDV的感染监测提供技术支撑。主要研究内容包括:本研究收集了60份2017-2019年江苏部分地区疑似犬瘟热病料,采用RT-PCR法鉴定了22份病料样品为CDV核酸阳性,进一步通过扩增完整H基因、核酸测序、BLAST比对、同源性比对、遗传进化分析和N-糖基化位点统计分析显示,其中18份America-1型毒株与疫苗株（Ondetstepoort株）高度同源;其余4份属Asia-1型毒株（分别命名为YZ-4、NJ-13、NJ-21、YZ-27）,与疫苗株氨基酸同源性在90.1%-91.2%之间,毒株间同源性为97.2%-99.8%,与国内流行Asia-1型毒株同源性较高（99.7%-100%）;4株Asia-1型毒株在H蛋白584-586位点均具有潜在的N-糖基化修饰,具有Asia-1型强毒株的分子特征;另外,YZ-4株、NJ-21株和YZ-27株H蛋白SLAM受体结合区域未发生改变（519R/530G/549Y）,而NJ-13株的受体结合区域突变为519R/530G/549H,提示该毒株与宿主结合能力可能发生改变。本研究扩充了CDV单克隆抗体杂交瘤细胞株库,基于重组H蛋白的间接ELISA法筛选获得7株稳定分泌抗H蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株（分别命名为3B1、3B5、3C5、3D5、5A6、4G12和7B2）,由此产生的抗体亚类均鉴定为Ig G1κ。间接免疫荧光试验显示上述单克隆抗体均能与CDV发生反应,不与犬细小病毒、犬冠状病毒以及犬流感病毒反应,具有良好特异性;病毒中和试验测定其培养上清的抗体中和效价为24-28,诱生BALB/c小鼠腹水的抗体中和效价为102-106,其中3B5、5A6、4G12、7B2之间的叠加系数均在50%以上,表明这4株单克隆抗体识别不同抗原表位;连续传代检测显示在第20代仍具有高效分泌抗体的能力,表明其稳定性良好;另外,3B5、5A6、4G12和7B2除能中和Ondetstepoort疫苗株（America-1型）外,还能中和当前流行的Asia-1型CDV毒株,其中3B5抗Ondetstepoort株和YZ-4株的中和效价分别为28和27,具有较好的广谱中和活性。本研究以HRP酶标的3B5单克隆抗体和重组H蛋白为基础建立了CDV抗体竞争ELISA检测方法,采用方阵滴定法CDV抗体竞争ELISA检测方法的最佳包被抗原（重组H蛋白）浓度为4μg/m L,H-RP酶标3B5抗体最佳稀释浓度为1:3 200,待检血清最佳稀释浓度为1:8,血清样本抑制率（PI）≥45%判定为阳性,与国外商品化的犬瘟热抗体试剂盒相比,检测结果符合率为97%,具有良好的特异性和敏感性。本研究以HRP酶标的重组H蛋白和3B5单克隆抗体为基础建立了CDV抗原竞争ELISA检测方法,采用方阵滴定法确定CDV抗原竞争ELISA检测方法的最佳包被抗体（3B5）浓度为2μg/m L、HRP酶标重组H蛋白最佳稀释浓度为1:1 600,经反应条件优化,该方法最低病毒检测量为103TCID50/m L,特异性和重复稳定性良好,与RT-PCR法检测临床样品的符合率达100%。综上,本研究对江苏部分地区开展了CDV分子流行病学调查,分析流行毒株的遗传变异规律,及时总结其流行病学态势和分子变异情况;同时,扩充了CDV毒株资源库和CDV单克隆抗体杂交瘤细胞株库,筛选了具有广谱中和活性的抗H蛋白单克隆抗体;以此建立了CDV抗原和抗体竞争ELISA检测方法,完善CD病原学和血清学检测方法和评价CDV感染水平,为科学防控CD提供技术支撑。
王召阳[3]（2020）在《犬瘟热病毒流行毒株序列分析及纳米抗体噬菌体库的构建与筛选》文中指出犬瘟热（CD）是由犬瘟热病毒（CDV）引起的一种急性且高度传染性的传染病。CD的发生率很高,致死率高达50%,严重影响了犬类繁殖和毛皮动物繁殖的发展。因此,本研究收集济南地区疑似感染CD的临床样本,扩增CDV H基因并进行遗传差异分析。同时,用CDV免疫羊驼,构建犬瘟热病毒特异性纳米抗体噬菌体文库,并进行犬瘟热的纳米抗体的筛选和表达。实验1:济南犬瘟热病毒H基因的克隆及遗传进化分析为了调查济南宠物犬瘟热的感染状况,于2019年1月至2019年6月在济南一家宠物医院随机收集了56例怀疑感染CDV的临床拭子样本,通过RT-PCR方法扩增了CDV H基因的全长序列,经测序后分析了H基因序列的遗传变异。结果显示,RT-PCR共检测到7个阳性样品。H基因核苷酸同源性为98.7%-99.9%,氨基酸同源性为98.7%-100%。与疫苗株相比,差异很大。与疫苗株相比,同源性为90.0%-90.9%,氨基酸同源性为88.8%-91.4%。遗传进化表明,这7个菌株均为中国目前所有的亚洲Ⅰ型菌株,与北京毒株（BJ17BC1）及黑龙江毒株（HRB-E8和HLJ-1-14）相似。与广东株（GD1811和GD1810）形成一个大的分散分支。H基因的氨基酸基因分析表明,与参考菌株相比,7个毒株变异程度不同。糖基化位点分析显示,除了SD-07包含8个潜在的天冬酰胺糖基化位点外,其余6个菌株均为9个潜在的天冬酰胺糖基化位点,而这6个菌株均包含野生株。唯一的g3（309）糖基化位点与疫苗株有很大差异,但与亚洲Ⅰ野生株高度一致。H基因抗原的预测分析显示7种野生病毒株与疫苗株有显着差异。研究表明,济南流行的CDV主要是亚洲Ⅰ型。这7个野毒株与疫苗株有很大的遗传差异,并且不同株之间存在遗传多样性。实验2:CDV特异性抗体的噬菌体文库的构建和鉴定为了获得CDV特异性抗体噬菌体文库,首先使用超纯化的CDV,然后使用纯化的CDV免疫羊驼,使用巢式PCR扩增纳米抗体（Nanobodies,Nbs）序列,构建CDV特异性抗体噬菌体文库,然后选择40个单克隆,计算阳性克隆的数量,随机选择13个序列进行序列验证,并计算存储容量并分析文库多样性。结果表明,第四次免疫后,血清抗体滴度可达1:25,000,符合文库建设的要求。巢式PCR扩增了一个400 bp的条带,与预期的Nbs大小一致。噬菌体展示文库的文库容量确定为3.41×109 PFU,阳性率为90%。测序结果表明,选择的13个VHH片段的序列不同,其中互补性决定了3区（CDR3）的最佳多样性。以上结果表明该研究成功构建了CDV特异性抗体噬菌体文库。该文库容量大,多样性丰富,阳性率高,为后续的纳米抗体表达奠定了基础。实验3:犬瘟热特异性纳米抗体的筛选和表达将纯化的CDV包被在ELISA板上,并对CDV特异性抗体噬菌体文库进行三轮淘选以富集特异性结合CDV的噬菌体。选择单克隆,并使用噬菌体-ELISA鉴定和选择具有高结合能力的噬菌体。通过巴斯德毕赤酵母表达系统表达和纯化该基因序列,并通过ELISA和IFA鉴定其结合力。结果表明,经过三轮淘选,总共富集了85个阳性克隆,阳性率为88.5%（85/96）;酵母表达系统用于表达两个纳米抗体。WB鉴定结果表明,在15 kDa处有明显的条带。ELISA和IFA鉴定实验中表达的两种纳米抗体均可特异性结合CDV。上述结果表明该研究成功地筛选并表达了两种与CDV特异性结合的纳米抗体菌株。综上,本研究初步分析了济南地区当前CDV流行株的遗传差异,对有针对性的有效CD防治措施具有指导意义。成功构建了CDV特异性抗体噬菌体文库,表达纯化了2株特异性结合CDV的纳米抗体,为后期建立犬瘟热诊断方法和筛选具有中和活性的纳米抗体提供了实验基础。
麻旭普[4]（2020）在《犬瘟热的流行病学特征及临床对症治疗》文中进行了进一步梳理犬瘟热由犬瘟热病毒引起,具有急性、高度接触性且致死性强等特点,是困扰宠物犬健康生长的重要疾病之一。有关犬瘟热的流行病学特征、临床症状及其有效的治疗措施仍是目前人们比较关注的问题。本文对犬瘟热的临床症状、实验室诊断及与典型传染病鉴别诊断,分析了犬的品种、年龄及接种疫苗对犬瘟热发病率的影响,并针对临床上不同类型犬瘟热的对症治疗及特异治疗方案进行了总结,这对于犬瘟热的防控、诊断和有效治疗具有重要的应用指导价值。
才让吉[5]（2020）在《犬瘟热的诊断与防治》文中研究指明近年来,人们生活水平不断提高,城乡养狗数量也在不断增加,同时狗传染病的发生率也大大增加,尤其是犬瘟热病更是高发。犬瘟热是一种急性、高接触性传染病,一旦发病会引起大批犬、貂、狐等动物发病,且病死率高达90%,给养殖业带来巨大的损失,也是目前危害宠物饲养业的重大疫病之一。本文从犬瘟热病因出发,分析该病的临床诊断和防治手段。
张丹辉[6]（2020）在《陕西圈养大熊猫常见病毒病检测与防治研究》文中研究说明秦岭大熊猫是大熊猫的一个独立亚种,因为头圆形似猫,因而被称为“国宝中的美人”。作为和平使者,为增进国际友谊、提升陕西省的形象和美誉度发挥了重要作用。2014年11月至2015年5月份,陕西省林业科学院秦岭大熊猫繁育研究中心（原陕西省珍稀野生动物抢救饲养研究中心）圈养的大熊猫突发犬瘟热（Canine Distemper）疫情,6只大熊猫感染,其中5只大熊猫临床发病,虽然经过一系列救治,但最终全部死亡。最后1只大熊猫犬瘟热病毒（Canine Distemper virus,CDV）检测阳性,经过治疗,痊愈康复。此次犬瘟热事件的发生是我国大熊猫人工圈养种群中比较严重的一次疫情,造成了无法弥补的损失。因而,大熊猫的疾病防控是保护圈养大熊猫种群的重要组成部分。已有大熊猫感染犬瘟热病毒、犬细小病毒、轮状病毒并引起死亡的案例,病毒性疾病不仅严重威胁着圈养大熊猫的健康和种群发展,而且也容易引发兽医公共卫生学问题。本研究主要评估了四种常见病毒性疾病对陕西大熊猫人工圈养种群健康的威胁程度,采用了国标中犬瘟热诊断技术（GB/T27532-2011）和犬细小病毒病诊断技术（GB/T27533-2011）中的检测方法对CDV和犬细小病毒（Canine Parvo virus,CPV）两种病毒进行了检测;采用了常规PCR方法对轮状病毒（Rotavirus,RV）和戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus,HEV）进行了检测。同时,采用了酶联免疫法（ELISA）测定了四种病毒抗体。研究结果表明:在2015年期间,检测到1只大熊猫感染犬瘟热病毒,该大熊猫一直未出现临床症状,经过隔离并治疗,最终康复。其他三种病毒均未检测到。在2016年,大熊猫四种病毒检测均为阴性。经过CDV疫苗免疫,大熊猫CDV抗体水平有明显的提高,保障了大熊猫种群的健康。此次检测为陕西圈养大熊猫重要病毒性疾病提供流行病学资料,采取相应的预防治疗措施为大熊猫人工圈养种群疫病防控提供了案例依据。
陈子龙,单小莉[7]（2019）在《犬瘟热的诊断与防治》文中认为犬瘟热是犬的第一大传染病,死亡率较高,治疗难度较大。为了完善犬瘟热的诊断方法,提高治疗效果,本文从诊断和治疗入手,采用常规诊断法和试纸快速诊断法确诊,中西医结合进行治疗。从众多案例中挑选了5例较有代表性的病例加以总结,分析其中的发病原因、诊断依据、治疗方法、预防措施,最终得出结论:防治犬瘟热,采取定期预防、及时治疗、中西医结合治疗措施方能达到较好疗效。
赵国清[8]（2019）在《威海地区主要毛皮动物常见病原体检测及微生态防治》文中进行了进一步梳理水貂、狐狸、貉子是具有较高利用价值的毛皮动物。威海市毛皮动物养殖量位居全国地级市前列。本实验主要对威海地区的水貂、狐狸、貉子感染犬瘟热病毒、细小病毒、阿留申病毒及常发细菌病等进行了病原体检测,提出了微生态防控措施。1.对威海区域内毛皮动物养殖场,通过查阅档案、实地走访和填写调查问卷相结合的方法进行调查,掌握养殖、防疫、免疫以及主要疫病存在情况。结果表明,毛皮动物存栏量下降较大,存栏500只以上养殖场饲养量所占比重,水貂、狐狸比重约为50%,貉子比重约为20%。导致毛皮动物发病的病毒性病原主要是犬瘟热病毒、细小病毒、阿留申病毒、伪狂犬病毒、狐狸脑炎病毒等;细菌性病原主要是绿脓杆菌、沙门菌、巴氏杆菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、肺炎双球菌、魏氏梭菌等细菌。2.对存栏5000只以上的毛皮动物养殖场随机采集病料,共采集140份样品（分别采集肝、肺、肾、脾、肠、脑）。对样本分别进行病理解剖、病毒检测、细菌检测。结果显示,犬瘟热病毒的感染率约27.14%,细小病毒的感染率为20.71%,阿留申病毒未检出,大肠杆菌的感染率为21.42%,克雷伯氏菌的感染率为15%,沙门氏菌的感染率为10.71%,支气管败血波氏杆菌的感染率为2.14%,绿脓杆菌的感染率为11.42%。犬瘟热病毒、细小病毒、大肠杆菌、克雷伯氏菌、沙门氏菌、支气管败血波氏杆菌、绿脓杆菌7种病原的单纯感染、二重感染、三重感染的感染率分别为30%、30.71%、5.71%。水貂的致病菌感染率比狐狸、貉子更高。3.血清学分型结果显示:大肠杆菌O88是主要的流行血清型,占检出血清型的33.3%;G型绿脓杆菌是主要流行菌株,占检出血清型的35.7%。药敏试验结果显示,感染性细菌对氨苄西林等青霉素类、头孢唑林等一、二代头孢菌素、复方新诺明、呋喃妥英等的耐药率较高;比较敏感的药物有:头孢他啶、头孢吡肟等三、四代头孢菌素,妥布霉素,左氧氟沙星,哌拉西林/他唑巴坦等含有β-内酰胺酶抑制剂的药物。4.对分离到的CDV和MEV株的基因进行了测序,分离到的2株CDV的核苷酸同源性为99.8%,与6株参考毒株的核苷酸同源性为98.1%99.1%,分离到的病毒同属于Asia-I型;分离到的3株MEV的核苷酸同源性为99.7%100%,3株毒株基因与28株参考毒株的基因同源性为97.3%99.1%,分离的细小病毒与CPV位于同一进化分支上。5.为了研究饲料中添加益生菌制剂对水貂免疫功能的影响。试验采用单因素完全随机设计试验,选择60日龄雄性水貂随机分为4组,每组3个重复,每个重复5只,Ⅰ组为空白对照组饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、1.5%益生菌制剂,试验期60 d,试验结束测定其免疫指标。结果表明,在基础饲料中添加益生菌制剂可以提高水貂的免疫功能。本调查揭示了威海地区主要毛皮动物感染性疾病的主要病原及其特性,找出了致病原的多重感染的发病规律,阐明了主要细菌病的病原耐药性,为威海地区毛皮动物疾病的诊断与防治提供了基础。
孔佳音[9]（2019）在《浅谈犬瘟热的诊断与治疗》文中研究指明犬瘟热具有较高的传染率和死亡率,对宠物养殖业和宠物饲养者有巨大威胁。本文首先介绍了犬瘟热的症状,包涵体检查、病毒分离、试纸诊断3种诊断方法,然后提出相应的治疗方法和预防措施。对于加深对犬瘟热的了解,及时采取诊断和治疗措施有重要的意义。
赵雨馨[10]（2019）在《沈阳地区宠物犬猫主要传染病流行特点及犬细小病毒的遗传进化分析》文中认为近年来,随着国民经济和城市化进程的迅速发展,宠物犬猫的饲养量不断增长,宠物的生活质量和健康情况也受到了更高的关注,但有关宠物流行病的相关研究却相对滞后。本研究通过调查沈阳地区宠物医院常见的传染病和寄生虫病的发病量,统计分析发现真菌病、细菌病、寄生虫病和病毒病的月平均发病量和月平均气温呈显着相关（P<0.001）,并有两个月的时滞效应。并且利用这四种类型疾病2013至2017年的月平均发病量数据进行时间序列分析,建立了ARIMA模型。本研究中的流行病学统计分析表明,沈阳地区宠物医院接诊量最高的传染病为犬细小病毒病。犬细小病毒传播范围广、感染性强,对我国宠物犬、军犬警犬及野生动物和经济动物都造成严重的危害。本研究采用分子生物学方法从遗传进化方面对沈阳地区犬细小病毒进行了研究和探讨。9份沈阳地区犬细小病毒的唾液、血液和粪便样本收集于2017～2018年,通过提取的VP2基因和NS1基因进行PCR克隆测序,得到沈阳地区犬细小病毒的基因序列,分析其氨基酸位点突变情况,进行同源性比对及系统发育树构建。结果表明通过测序得到的五条序列全部为CPV-2c型;亲缘关系与亚型和地区有关,与北京地区、吉林地区分离到的毒株序列较近,而与意大利、日本国家的序列相对较远。VP2序列中有10个核苷酸突变（nt14、16、520、817、819、1016、1042、1109、1278及1490）导致9个氨基酸的突变（aa5、6、174、273、339、348、370、426、497）。测得的6条NS1序列与7条标准毒株序列进行比对,发现其中有27个核苷酸突变（nt67、178、196、206、210、336、433、555、616、726、905、969、1017、1059、1207、1267、1463、1488、1558、1625、1664、1715、1728、1736、1792、1891、1953）导致12个氨基酸的突变（aa23、60、66、69、145、206、302、403、423、460、520、555）。沈阳地区的犬细小病毒和其他地区相比,进化速率没有显着差异,共发现12个位点存在正选择。这些突变可能是导致病毒变异的原因,新发现的突变位点也为以后的研究提供了参考。
二、犬瘟热的诊断与治疗（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、犬瘟热的诊断与治疗（论文提纲范文）
（1）大连市犬瘟热、犬细小病毒流行病学调查（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1 犬瘟热 |
| 1.1 犬瘟热病毒的生物学特征 |
| 1.2 犬瘟热流行病学调查 |
| 1.3 犬瘟热病的预防与治疗 |
| 2 犬细小病毒病 |
| 2.1 犬细小病毒的生物学特征 |
| 2.2 犬细小病毒病流行病学调查 |
| 2.3 犬细小病毒病预防与治疗 |
| 3 研究的目的与意义 |
| 第二章 调查研究 大连市城区犬瘟热和犬细小病毒流行病学与调查 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试剂盒检测方法 |
| 1.3 PCR验证方法 |
| 1.3.1 犬瘟热 |
| 1.3.2 犬细小病毒 |
| 1.4 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）犬瘟热病毒H蛋白单克隆抗体的制备及竞争ELISA检测方法的建立（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 犬瘟热研究进展 |
| 1.1 犬瘟热病毒病原学特性 |
| 1.2 CDV基因组结构与功能 |
| 1.2.1 核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein, N) |
| 1.2.2 磷蛋白(Phosphoprotein, P) |
| 1.2.3 基质蛋白(Matrix protein, M) |
| 1.2.4 大蛋白(Large polymerase protein, L) |
| 1.2.5 融合蛋白(Fusion protein, F) |
| 1.2.6 血凝素蛋白(Hemagglutinin protein, H) |
| 1.2.7 非结构蛋白(V/C) |
| 1.3 国内外犬瘟热流行病学 |
| 1.4 犬瘟热诊断方法的研究进展 |
| 1.4.1 犬瘟热血清学检测方法 |
| 1.4.2 犬瘟热分子生物学检测方法 |
| 第二章 江苏部分地区犬瘟热病毒分子流行病学调查 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 细胞及病料 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.1.4 引物设计 |
| 2.1.5 RT-PCR鉴定 |
| 2.1.6 分离毒株H基因片段的扩增与分析 |
| 2.2 .结果 |
| 2.2.1 病料的RT-PCR鉴定 |
| 2.2.2 全长H基因片段的扩增 |
| 2.2.3 H基因遗传变异分析 |
| 2.2.4 H基因序列分析 |
| 2.2.5 H基因同源性比对分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 犬瘟热病毒H蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 主要实验材料及实验动物 |
| 3.1.2 病毒的培养与纯化 |
| 3.1.3 截短H基因的扩增与原核表达 |
| 3.1.4 动物免疫与杂交瘤细胞株的筛选 |
| 3.1.5 单克隆抗体的特异性检测 |
| 3.1.6 腹水的制备、抗体亚类与中和活性分析 |
| 3.1.7 单克隆抗体抗原识别位点的差异性分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 截短H片段的克隆及重组蛋白的制备 |
| 3.2.2 杂交瘤细胞株的筛选及其特异性检测 |
| 3.2.3 单克隆抗体的生物学特性 |
| 3.2.4 单克隆抗体抗原识别位点的差异性分析 |
| 3.2.5 单克隆抗体稳定性分析 |
| 3.2.6 广谱病毒中和活性检测 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 犬瘟热病毒抗体竞争ELISA检测方法的建立 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 抗体、质粒及实验动物 |
| 4.1.2 血清和样品 |
| 4.1.3 主要试剂 |
| 4.1.4 主要仪器 |
| 4.1.5 重组蛋白的表达及纯化 |
| 4.1.6 单克隆抗体的纯化及其HRP标记 |
| 4.1.7 抗原包被浓度和酶标抗体稀释度的确定 |
| 4.1.8 待检血清最佳稀释度的确定 |
| 4.1.9 包被条件的优化 |
| 4.1.10 最佳封闭液浓度和封闭时间的确定 |
| 4.1.11 酶标抗体最佳工作时间的确定 |
| 4.1.12 临界值的确定 |
| 4.1.13 特异性试验 |
| 4.1.14 敏感性试验 |
| 4.1.15 重复性试验 |
| 4.1.16 符合率试验 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 单克隆抗体的纯化 |
| 4.2.2 抗原包被浓度和酶标抗体稀释度的确定 |
| 4.2.3 血清最佳稀释度的确定 |
| 4.2.4 包被条件的确定 |
| 4.2.5 最佳封闭液浓度和封闭时间的确定 |
| 4.2.6 酶标抗体最佳工作时间的确定 |
| 4.2.7 临界值的确定 |
| 4.2.8 特异性试验 |
| 4.2.9 敏感性试验 |
| 4.2.10 重复性试验 |
| 4.2.11 符合率试验 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 犬瘟热病毒抗原竞争 ELISA 检测方法的建立 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 细胞、病毒及实验动物 |
| 5.1.2 主要试剂 |
| 5.1.3 主要仪器 |
| 5.1.4 重组蛋白的纯化及其HRP标记 |
| 5.1.5 单克隆抗体的纯化 |
| 5.1.6 抗体包被浓度和酶标抗原稀释度的确定 |
| 5.1.7 包被条件的优化 |
| 5.1.8 最佳封闭液浓度和封闭时间的确定 |
| 5.1.9 酶标抗原最佳工作时间的确定 |
| 5.1.10 临界值的确定 |
| 5.1.11 特异性试验 |
| 5.1.12 敏感性试验 |
| 5.1.13 重复性试验 |
| 5.1.14 符合率试验 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 抗体包被浓度和酶标抗原稀释度的确定 |
| 5.2.2 包被条件的确定 |
| 5.2.3 最佳封闭液浓度和封闭时间的确定 |
| 5.2.4 酶标抗原最佳工作时间的确定 |
| 5.2.5 临界值的确定 |
| 5.2.6 特异性试验 |
| 5.2.7 敏感性试验 |
| 5.2.8 重复性试验 |
| 5.2.9 符合率试验 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（3）犬瘟热病毒流行毒株序列分析及纳米抗体噬菌体库的构建与筛选（论文提纲范文）
| 附件 |
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 犬瘟热简介 |
| 1.2 犬瘟热病毒简介 |
| 1.3 犬瘟热流行病学及预防 |
| 1.4 犬瘟热诊断方法 |
| 1.5 犬瘟热治疗 |
| 1.5.1 犬瘟热的对因治疗 |
| 1.5.2 犬瘟热的对症治疗 |
| 1.6 纳米抗体的发现 |
| 1.7 纳米抗体的特点 |
| 1.8 纳米抗体库的筛选 |
| 1.9 纳米抗体的应用 |
| 1.9.1 纳米抗体在检测中的应用 |
| 1.9.2 纳米抗体在疾病治疗中的应用 |
| 1.10 研究的目的和意义 |
| 第二章 济南地区犬瘟热病毒H基因克隆及其遗传进化分析 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 病料来源 |
| 2.1.2 主要试剂与耗材 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 病料处理 |
| 2.2.2 样品RNA提取及反转录 |
| 2.2.3 引物设计与合成 |
| 2.2.4 H基因的扩增与克隆 |
| 2.2.5 H基因序列分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 CDVH基因扩增 |
| 2.3.2 CDVH基因同源性分析 |
| 2.3.3 CDV H基因序列分析 |
| 2.3.4 CDVH基因潜在天冬酰胺糖基化位点分析 |
| 2.3.5 CDVH基因氨基酸位点变异分析 |
| 2.3.6 CDVH基因抗原表位预测分析 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 CDV特异性抗体噬菌体文库的构建与鉴定 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 毒种、载体和实验动物 |
| 3.1.2 主要试剂与耗材 |
| 3.1.3 主要仪器与设备 |
| 3.1.4 主要溶液配制 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 CDV的扩繁与鉴定 |
| 3.2.2 羊驼免疫及抗体水平检测 |
| 3.2.3 免疫后淋巴细胞分离 |
| 3.2.4 外周血总RNA提取 |
| 3.2.5 RNA的反转录 |
| 3.2.6 VHH基因PCR扩增 |
| 3.2.7 M13噬菌体抗体库的构建 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 CDV-11株病毒培养 |
| 3.3.2 CDV-11株纯化及鉴定 |
| 3.3.3 ELISA检测血清抗体效价 |
| 3.3.4 VHH基因PCR扩增结果 |
| 3.3.5 M13噬菌体库构建与鉴定 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 犬瘟热纳米抗体的筛选与表达 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 菌株和载体 |
| 4.1.2 主要试剂与耗材 |
| 4.1.3 主要仪器与设备 |
| 4.1.4 主要溶液配制 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 CDV特异性抗体噬菌体文库的构建 |
| 4.2.2 CDV特异性重组噬菌体的淘选和富集 |
| 4.2.3 噬菌体单克隆检测 |
| 4.2.4 重组表达载体的构建 |
| 4.2.5 重组抗体的表达 |
| 4.2.6 重组抗体的纯化及WB鉴定 |
| 4.2.7 ELISA方法验证重组抗体结合力 |
| 4.2.8 IFA验证重组抗体特异性结合CDV |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 CDV特异性纳米抗体的淘选 |
| 4.3.2 噬菌体单克隆检测 |
| 4.3.3 重组表达载体的PCR鉴定 |
| 4.3.4 纳米抗体的表达及纯化 |
| 4.3.5 ELISA方法鉴定CDV纳米抗体结合力 |
| 4.3.6 IFA验证重组抗体结合CDV |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（4）犬瘟热的流行病学特征及临床对症治疗（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1发病症状 |
| 11.2诊断 |
| 1.2.1临床诊断 |
| 1.2.2实验室诊断 |
| 1.2.3血清学检查 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1实验室诊断 |
| 2.2与典型传染病的鉴别诊断 |
| 2.2.1与犬狂犬病的鉴别 |
| 2.2.2与犬细小病毒病的鉴别 |
| 2.2.3与犬副伤寒的鉴别 |
| 2.3犬品种、年龄及接种疫苗对犬瘟热发病率的影响 |
| 2.3.1品种的影响 |
| 2.3.2年龄的影响 |
| 2.3.3接种疫苗的影响 |
| 2.3.4临床对症治疗及特异治疗方案 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
（5）犬瘟热的诊断与防治（论文提纲范文）
| 1 致病原理 |
| 2 诊断 |
| 2.1 临床诊断 |
| 2.2 实验室诊断 |
| 3 治疗 |
| 4 防治 |
| 4.1 疫苗免疫 |
| 4.2 做好犬舍清洁和消毒 |
| 4.3 及时对病犬进行隔离处理 |
| 5 结束语 |
（6）陕西圈养大熊猫常见病毒病检测与防治研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 大熊猫的进化史和习性 |
| 1.1.1 大熊猫的历史分布 |
| 1.1.2 大熊猫的特点及习性 |
| 1.2 人工圈养大熊猫历史及现状 |
| 1.3 大熊猫常见病毒病的危害及研究进展 |
| 1.4 圈养大熊猫常见的病毒病 |
| 1.4.1 大熊猫犬瘟热 |
| 1.4.2 大熊猫犬细小病毒 |
| 1.4.3 大熊猫轮状病毒 |
| 1.4.4 戊型肝炎病毒 |
| 1.5 研究的内容与意义 |
| 第二章 圈养大熊猫常见病毒病的诊断检测 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 材料样本 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 仪器和设备 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 样本处理 |
| 2.2.2 提取RNA |
| 2.2.3 提取DNA |
| 2.2.4 大熊猫犬瘟热病毒检测 |
| 2.2.5 大熊猫犬细小病毒检测 |
| 2.2.6 大熊猫轮状病毒检测 |
| 2.2.7 大熊猫戊型肝炎病毒检测 |
| 2.2.8 ELISA检测 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 PCR检测结果 |
| 2.3.2 CDV快速检测卡结果 |
| 2.3.3 ELISA检测结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 圈养大熊猫常见病毒病的综合防治措施 |
| 3.1 平时预防措施 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.1.3 试验结果 |
| 3.2 出现疫情时的防治 |
| 3.2.1 疫情的报告及诊断 |
| 3.2.2 紧急措施 |
| 3.3 参考治疗 |
| 3.3.1 抗病毒、补液 |
| 3.3.2 抗菌消炎 |
| 3.3.3 止吐、止泻 |
| 3.3.4 抗休克、痉挛 |
| 3.3.5 提高抵抗力 |
| 3.3.6 加强护理 |
| 3.3.7 免疫接种 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）犬瘟热的诊断与防治（论文提纲范文）
| 一、材料与方法 |
| 1. 治疗材料 |
| 2. 病例材料 |
| 3. 方法 |
| 二、结果与分析 |
| 1. 结果 |
| 2. 分析 |
| 三、讨论 |
| 1. 症状表现 |
| 2. 诊断方法 |
| 3. 治疗方法 |
| 4. 影响犬瘟热治疗效果的因素 |
| 四、结论 |
（8）威海地区主要毛皮动物常见病原体检测及微生态防治（论文提纲范文）
| 摘要 |
| SUMMARY |
| 缩略语表 |
| 第一章 毛皮动物主要病毒性传染病研究进展 |
| 1.1.犬瘟热研究进展 |
| 1.1.1.CDV的分类与形态结构 |
| 1.1.2.CDV基因组编码蛋白及其功能 |
| 1.1.3.CDV的流行病学 |
| 1.1.4.CDV的临床症状 |
| 1.1.5.CDV的诊断技术进展 |
| 1.1.6.CDV的防治研究进展 |
| 1.2.毛皮动物细小病毒病研究进展 |
| 1.2.1.细小病毒的分类 |
| 1.2.2.生物学差异 |
| 1.2.3.MEV的研究进展 |
| 1.2.4.细小病毒疫苗的研究进展 |
| 1.3.水貂阿留申病研究进展 |
| 1.3.1.AMDV的分类与形态结构 |
| 1.3.2.AMDV的分子生物学特性 |
| 1.3.3.AMDV的流行病学与临床症状 |
| 1.3.4.AMDV的检测技术进展 |
| 1.3.5.ADM的综合防治措施 |
| 第二章 毛皮动物主要细菌性疾病研究进展 |
| 2.1.大肠杆菌病研究进展 |
| 2.1.1.病原学 |
| 2.1.2.流行病学 |
| 2.1.3.临床症状与病理变化 |
| 2.1.4.防治措施 |
| 2.2.肺炎克雷伯氏菌病研究进展 |
| 2.2.1.病原学 |
| 2.2.2.流行病学 |
| 2.2.3.临床症状与病理变化 |
| 2.2.4.防治措施 |
| 2.3.绿脓杆菌病研究进展 |
| 2.3.1.病原学 |
| 2.3.2.流行病学 |
| 2.3.3.临床症状与病理变化 |
| 2.3.4.防治措施 |
| 第三章 威海地区主要毛皮动物养殖及疾病防治情况调查 |
| 3.1.材料与方法 |
| 3.1.1.调查范围 |
| 3.1.2.调查内容 |
| 3.1.3.调查途径 |
| 3.2.结果 |
| 3.2.1.养殖概况 |
| 3.2.2.防疫情况 |
| 3.2.3.常见疫病免疫情况 |
| 3.2.4.养殖用药情况 |
| 3.2.5.主要发病情况 |
| 3.3.讨论 |
| 3.3.1.养殖数量与密度的影响 |
| 3.3.2.不同饲养管理水平的影响 |
| 3.3.3.防疫措施的影响 |
| 3.3.4.疫苗免疫的因素 |
| 3.3.5.畜牧管理体制变动的影响 |
| 3.3.6.主要疾病传播流行特点 |
| 3.4.小结 |
| 第四章 威海地区主要毛皮动物大型养殖场常见病毒的PCR检测及序列分析 |
| 4.1.材料与方法 |
| 4.1.1.样品采集 |
| 4.1.2.主要实验试剂与仪器 |
| 4.1.3.样品的处理 |
| 4.1.4.核酸的提取 |
| 4.1.5.病毒性病原的检测 |
| 4.2.结果 |
| 4.2.1.病料剖检结果 |
| 4.2.2.CDV的检测结果 |
| 4.2.3.CDV的序列分析结果 |
| 4.2.4.MEV的检测结果 |
| 4.2.5.MEV的序列分析结果 |
| 4.2.6.AMDV的检测结果 |
| 4.2.7.感染统计结果 |
| 4.3.讨论 |
| 4.3.1.病毒性疾病持续流行 |
| 4.3.2.疫苗免疫保护出现漏洞 |
| 4.4.小结 |
| 第五章 威海地区主要毛皮动物大型养殖场病原菌的分离鉴定及药物敏感性试验 |
| 5.1.材料与方法 |
| 5.1.1.样品来源 |
| 5.1.2.主要实验试剂与仪器 |
| 5.1.3.样品剖检 |
| 5.1.4.细菌的分离培养 |
| 5.1.5.细菌的纯化与染色 |
| 5.1.6.生化鉴定与药敏试验 |
| 5.1.7.血清型鉴定 |
| 5.2.结果 |
| 5.2.1.病料剖检症状 |
| 5.2.2.细菌的分离及生化鉴定结果 |
| 5.2.3.分离菌的药敏实验结果 |
| 5.2.4.血清学分型统计结果 |
| 5.2.5.感染统计结果 |
| 5.3.讨论 |
| 5.3.1.病原种类多样,混合感染突出 |
| 5.3.2.条件性致病菌感染流行普遍 |
| 5.3.3.细菌耐药性需要加强关注 |
| 5.4.小结 |
| 第六章 饲料中添加益生菌制剂对水貂免疫功能的影响 |
| 6.1.材料与方法 |
| 6.1.1.实验材料 |
| 6.1.2.实验动物及饲粮 |
| 6.1.3.实验设计与饲养管理 |
| 6.1.4.免疫指标的测定 |
| 6.1.5.疫苗抗体的测定 |
| 6.1.6.试验数据统计 |
| 6.2.结果 |
| 6.2.1.益生菌制剂对水貂免疫指标的影响 |
| 6.2.2.益生菌制剂对水貂犬瘟热疫苗抗体的影响 |
| 6.3.讨论 |
| 6.4.小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师简介 |
（9）浅谈犬瘟热的诊断与治疗（论文提纲范文）
| 1 犬瘟热的症状 |
| 2 犬瘟热的诊断 |
| 2.1 包涵体检查 |
| 2.2 病毒分离 |
| 2.3 试纸诊断 |
| 3 犬瘟热的治疗及预防 |
| 3.1 犬瘟热的治疗 |
| 3.2 犬瘟热的预防 |
| 4 小结 |
（10）沈阳地区宠物犬猫主要传染病流行特点及犬细小病毒的遗传进化分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 宠物猫狗的现状及宠物医院的发展 |
| 1.2 宠物猫狗主要流行病 |
| 1.2.1 犬细小病毒病 |
| 1.2.2 犬瘟热 |
| 1.2.3 犬瘟热病毒的实验室诊断 |
| 1.2.4 犬瘟热病毒分离鉴定 |
| 1.2.5 犬瘟热病毒分子生物学诊断方法 |
| 1.2.6 犬冠状病毒病 |
| 1.2.7 猫瘟 |
| 1.2.8 犬猫皮肤病及其他寄生虫病 |
| 1.3 ARIMA模型 |
| 1.4 犬细小病毒VP2基因和NS1基因 |
| 1.5 本研究的目的及意义 |
| 第二章 沈阳地区宠物猫狗流行病的季节性分析 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 数据搜集 |
| 2.1.2 病例定义 |
| 2.1.3 数据处理及统计方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 统计结果 |
| 2.2.2 四种类型的流行病ARIMA模型 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 宠物猫狗传染病季节性变化影响因素分析 |
| 2.3.2 辽宁地区犬细小病毒流行情况 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 犬细小病毒遗传进化分析 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 临床样本 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.1.4 犬细小病毒DNA的提取 |
| 3.1.5 VP2、NS1基因扩增 |
| 3.1.6 VP2、NS1基因序列拼接 |
| 3.1.7 序列比对及病毒鉴定 |
| 3.1.8 VP2及NS1序列分析及系统发育树构建 |
| 3.1.9 分子进化分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 VP2、NS1基因扩增结果 |
| 3.2.2 VP2、NS1基因同源性分析 |
| 3.2.3 VP2、NS1基因系统发育树的构建 |
| 3.2.4 亚型分析和VP2、NS1基因突变位点分析 |
| 3.2.5 分子进化分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 我国CPV及各亚型流行情况 |
| 3.3.2 犬细小病毒的分子进化分析 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 结论、创新点和展望 |
| 4.1 结论 |
| 4.2 创新点 |
| 4.3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 |
四、犬瘟热的诊断与治疗（论文参考文献）
- [1]大连市犬瘟热、犬细小病毒流行病学调查[D]. 温慧明. 沈阳农业大学, 2020(05)
- [2]犬瘟热病毒H蛋白单克隆抗体的制备及竞争ELISA检测方法的建立[D]. 孙伟伟. 西藏大学, 2020(12)
- [3]犬瘟热病毒流行毒株序列分析及纳米抗体噬菌体库的构建与筛选[D]. 王召阳. 中国农业科学院, 2020(01)
- [4]犬瘟热的流行病学特征及临床对症治疗[J]. 麻旭普. 现代畜牧兽医, 2020(05)
- [5]犬瘟热的诊断与防治[J]. 才让吉. 中国畜禽种业, 2020(05)
- [6]陕西圈养大熊猫常见病毒病检测与防治研究[D]. 张丹辉. 西北农林科技大学, 2020(02)
- [7]犬瘟热的诊断与防治[J]. 陈子龙,单小莉. 农村科技, 2019(06)
- [8]威海地区主要毛皮动物常见病原体检测及微生态防治[D]. 赵国清. 甘肃农业大学, 2019(11)
- [9]浅谈犬瘟热的诊断与治疗[J]. 孔佳音. 中国畜禽种业, 2019(07)
- [10]沈阳地区宠物犬猫主要传染病流行特点及犬细小病毒的遗传进化分析[D]. 赵雨馨. 沈阳农业大学, 2019(03)