一、脑垂体的制取与保存（论文文献综述）
武祥伟,孔令富,荣华,张娟,胡惠永,王晓雯,毕保良[1]（2021）在《淡水养殖学实验课程教学体系的改革探索》文中指出为了改革淡水养殖学实验课程教学体系,对接"新农科"改革发展要求,在剖析当前实验课程教学现状的基础上,从教学目标、内容、方法等方面对教学体系进行了重构。首先设置了淡水养殖学实验课程教学的地位与目标,以此为基础设计了基础性实验、技能性实验、综合性实验和自行设计型实验,构建了从基础到创新、逐级提高的多层次、模块化实验教学模式,并依据教学目标,设计了讲解、示范、引导等实验教学方法,使实验教学由"灌输式"转变为"自主式"。该研究促进了学生创新能力的提升,契合了当前淡水养殖产业的发展需求。
高鹏[2]（2020）在《好食脉孢菌发酵麸皮制备游离阿魏酸及其改性研究》文中提出近年来阿魏酸逐渐进入人们的视野,以其为主要物质的医疗药物,功能性食品等都如雨后春笋般诞生。其良好的清除自由基、抗菌消除炎症、预防肿瘤、降血脂等特性深受人们喜爱和关注,因而使其具有了良好的开发和应用前景;中国是小麦种植与出产大国,而加工后的小麦麸皮,多被用作动物饲料的投喂,而较少再次利用,进而造成了谷物资源的极大浪费。本课题以小麦麸皮为原材料,采用固态发酵技术,提取麸皮中丰富的阿魏酸资源,并在阿魏酸分子中引入亲水性较强的葡萄糖基团,制备以阿魏酸葡萄糖酯为主要成分的新型生物饲料添加剂。主要研究方法与结果如下:本文探索研究了好食脉孢菌在固态发酵条件下,发酵小麦麸皮生产阿魏酸（游离型）的最佳工艺条件。通过单因素试验结合正交试验,以阿魏酸（游离型）得率为考察指标,得到最优阿魏酸生产工艺参数为:好食脉孢菌接种量达5%、固态发酵培养温度30℃、麦麸和水料液比1:0.75、固态发酵培养时间5 d。在以上条件下,阿魏酸（游离型）的得率为71.45%。以浓缩冻干后得到的游离型阿魏酸样品为原料,引入葡萄糖基团对阿魏酸分子进行结构修饰。以阿魏酸的转化率设立为考察指标,且通过单因素结合正交试验法,探索合成阿魏酸葡萄糖酯的最优工艺参数:在催化反应时间为32 h、阿魏酸酯化反应温度为60℃、丁酮配比1%甲醇溶液为反应介质、固定化脂肪酶添加量10%、底物的酸糖摩尔比为1:1,阿魏酸转化率达到最高为25%。为进一步提高糖酯合成速率和转化率,采用纳米金与南极假丝酵母脂肪酶形成的金-酶杂化体系作为新型催化剂,催化葡萄糖酯化改性阿魏酸,以杂化酶催化效果为考察指标,采用紫外光谱结合红外光谱分析法,分别测定杂化前后南极假丝酵母脂肪酶结构的变化,确定制备杂化酶最佳工艺为:0.7 g假丝酵母脂肪酶加入10 mL粒径为11.55nm的纳米金溶液,于30℃恒温振荡反应器内反应24 h;并确定采用杂化酶催化糖酯化改性阿魏酸的最佳工艺为:丁酮复配1%甲醇溶液为反应介质,在底物酸糖比为1:1、反应时间为24 h、反应温度为60℃、杂化酶添加量为10%,可以获得更高的阿魏酸转化率,为36.8%。试验还探究了阿魏酸改性前后的理化特性和生物特性,研究发现葡萄糖酯具有优于阿魏酸的生物特性。其中改性前后对DPPH自由基的清除,阿魏酸葡萄糖酯好于阿魏酸,除此之外,阿魏酸与阿魏酸葡萄糖酯二者对羟基自由基和H2O2也有着优秀的清除效果;二者对于二价铁离子也有着显着的螯合作用,并且二者溶液浓度与螯合能力呈正相关,在6.0 mg/mL的相同浓度时,阿魏酸葡萄糖酯对于二价铁离子的螯合能力为67%,是阿魏酸的1.2倍;此外,阿魏酸葡萄糖酯相比于阿魏酸拥有着更优异的水溶性表现,室温条件下可达到阿魏酸的28倍;抑菌性试验得到,改性前后二者对于大肠杆菌、酵母菌以及金黄色葡萄球菌都有着一定抑制能力,并且均对于黑曲霉无显着抑制能力。
亓英姿[3]（2019）在《杜仲—刺蒺藜对老龄自发性高血压大鼠肠道微生物组的影响》文中研究表明目的:通过收集老年高血压与功能性胃肠病并存的有效病例,探讨老年高血压与功能性胃肠病并存患者的用药规律。设计实验研究部分,评估高血压时肠道微生物的变化并观察缬沙坦及导师常用药对杜仲-刺蒺藜对老龄高血压大鼠肠道微生物的影响,全面评价杜仲-刺蒺藜的效用,探索杜仲-刺蒺藜降压的机制。通过粪菌移植实验进一步明确、验证菌群在高血压病理过程中的地位和作用,为将来从菌群角度调控血压提供实验支撑。方法:1.老年高血压与功能性胃肠病并存的用药规律研究:收集157例高血压与功能性胃肠病并存病例,基于中医传承辅助平台,运用现代数据挖掘理念和方法,解析导师杨传华教授治疗老年高血压与功能性胃肠病并存的用药处方规律。2.高血压时肠道微生物的变化及缬沙坦对老龄高血压大鼠肠道微生物组的影响:14只18月龄雄性SHRs随机分为缬沙坦组与SHR组,以7只18月龄雄性WKY大鼠作为正常对照,灌胃给药8周,每周测体重血压。8周后,ELISA法检测血清氨基末端脑钠肽前体（NT-pro BNP）、神经肽Y（NPY）、C反应蛋白（CRP）、血管紧张素II（Ang II）、去甲肾上腺素（NE）水平;实时荧光定量PCR（q RT-PCR）法检测胸主动脉IKK-α、IKK-β、IKBα、NF-κB p65的m RNA表达水平;无菌原则取大鼠应激粪便样本,16S V4区扩增子测序与分析。3.杜仲-刺蒺藜药对对老龄高血压大鼠肠道微生物组的影响:选用28只18月龄雄性SHRs,将其随机分为对照组（SHR）和杜仲-刺蒺藜药对干预高、中、低剂量组（H、M、L）共4组,灌胃给药8周,每周测体重、血压。8周后,ELISA法检测NT-pro BNP、NPY、CRP、Ang II、NE水平;q RT-PCR法检测胸主动脉IKK-α、IKK-β、IKBα、NF-κB p65的m RNA表达水平;HE染色及电镜观察血管形态变化;无菌原则取大鼠应激粪便样本,16S V4区扩增子测序与分析;采用气相色谱法检测粪便样本中短链脂肪酸（SCFAs）的含量。4.粪菌移植实验:选用14只18月龄雄性SHRs随机分为各7只的两组,分别为ET→SHR（杜仲刺蒺藜中剂量组大鼠粪便制取的粪菌液移植至SHR大鼠）组及N→SHR（等剂量生理盐水灌胃的SHR）组;14只18月龄雄性WKY大鼠随机分为各7只的两组,分别为SHR→WKY（SHR组大鼠粪便制取的粪菌液移植至WKY大鼠）组及N→WKY（等剂量生理盐水灌胃的WKY）组。以上四组经8周的口-上消化道粪菌液移植操作,ELISA法检测NT-pro BNP、NPY、CRP、Ang II、NE水平;化学法检测血常规、尿常规、肝肾功指标;无菌原则取大鼠应激粪便样本,16S V4区扩增子测序与分析。结果:1.老年高血压与功能性胃肠病并存用药规律研究:157例有效高血压与功能性胃肠病并存病例中,当归、黄芪、川芎、黄连、泽泻、刺蒺藜、黄芩、茯苓、牛膝、杜仲为常用前十味常用药。药物分类以补虚药、清热药、平肝熄风药、活血化瘀药为最多。导师常用药对为杜仲-刺蒺藜药对。2.高血压时肠道微生物的变化及缬沙坦对老龄高血压大鼠肠道微生物组的影响:缬沙坦干预的SHR大鼠经连续8周灌胃后,出现体质量下降现象（253.21±21.65vs 298.69±17.02 g,P<0.05）,血压水平（收缩/舒张压:170.33±10.74/113.22±7.39 vs203.75±11.42/136.77±8.01 mm Hg,均P<0.05）明显下降,血清NT-pro BNP、NPY、CRP水平（NT-pro BNP:304.11±23.62 vs 471.67±61.87ng/L;NPY:1896.39±14.44 vs3826.72±68.35ng/L、CRP:37.73±16.27 vs 68.51±9.47μg/ml,均P<0.05）下降,有较明显的血管保护作用,但缬沙坦干预后SHR大鼠肠道微生物组OTU发生改变,组内生物多样性降低,其在属水平上的特征菌属分别为:Lactobacillus。3.杜仲-刺蒺藜药对对老龄高血压大鼠肠道微生物组的影响:高、中剂量杜仲-刺蒺藜药对干预后,大鼠血压明显低于SHR对照组（收缩/舒张压:170.33±10.74/114.03±6.62 mm Hg、171.57±10.35/112.36±7.32 mm Hg vs 203.75±11.42/136.77±8.01 mm Hg,均P<0.05）,低剂量组血压无显着变化,高、中剂量组之间大鼠血压无差异;中剂量杜仲-刺蒺藜药对显着降低血清NT-pro BNP、NPY、CRP、Ang II水平（NT-pro BNP:321.47±31.45 vs 471.67±61.87ng/L;NPY:2001.87±26.65 vs3826.72±68.35 ng/L,CRP:42.37±12.97 vs 68.51±9.47μg/ml,Ang II:481.92±21.45vs 591.61±88.72 ng/L,均P<0.05）,高剂量杜仲-刺蒺藜药对显着降低血清NPY水平（NPY:2977.61±64.51 vs 3826.72±68.35 ng/L,P<0.05）;高、中剂量杜仲-刺蒺藜药对显着改善胸主动脉中NF-κB通路主要基因的m RNA表达水平（IKBα:1.25±0.08、1.42±0.06 vs 3.52±0.32;IKKβ:1.07±0.16、1.09±0.15 vs 4.59±0.21;NF-κB p65:1.79±0.16、2.38±0.17 vs 5.49±0.17;IKKα:0.75±0.06、0.81±0.07vs 0.25±0.05,均P<0.05）,低剂量杜仲-刺蒺藜药对对胸主动脉NF-κB通路主要m RNA表达无显着影响;杜仲-刺蒺藜高中剂量有较好的血管保护作用;干预后大鼠肠道微生物的组成、α多样性及β多样性发生改变,Anaeroplasma为杜仲-刺蒺藜中剂量组在属水平上的特征菌属;高剂量杜仲-刺蒺藜药对显着升高大鼠粪便乙酸、丙酸水平（乙酸:1976.32±42.36 vs 1349.67±74.31μg/g,丙酸:755.26±31.21 vs 358.76±40.83μg/g,均P<0.05）,中剂量杜仲-刺蒺藜药对显着升高大鼠粪便乙酸、丙酸、丁酸水平（乙酸:2346.78±37.91 vs 1349.67±74.31μg/g,丙酸:759.37±52.89 vs358.76±40.83μg/g,丁酸:1783.36±46.52 vs 389.21±48.34μg/g,均P<0.05）,低剂量杜仲-刺蒺藜药对显着升高大鼠粪便丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸水平（丁酸:862.37±60.18 vs 389.21±48.34μg/g,异丁酸:112.37±9.87 vs 52.17±9.16μg/g,戊酸:193.27±11.36 vs 70.31±9.67μg/g,异戊酸:150.78±10.36 vs 51.52±9.37μg/g,均P<0.05）;Anaeroplasma丰度与CRP浓度、NF-κB p65水平呈线性相关。4.粪菌移植实验:经过粪菌移植后,SHR→WKY大鼠血压水平（移植前后收缩/舒张压:144.73±11.34/83.36±9.73 mm Hg vs 164.83±12.98/102.24±9.47 mm Hg,P<0.05）升高,与N→WKY组相比,NT-pro BNP、CRP水平（NT-pro BNP:461.42±58.32vs 229.70±21.45ng/L,CRP:53.15±8.37 vs 26.12±3.92μg/ml,P<0.05）升高,与高血压有密切关系的Prevotellaceae（普氏菌科）、Prevotella（普氏菌属）在SHR→WKY组大量被发现;ET→SHR大鼠血压水平（移植前后收缩/舒张压:198.36±10.21/131.90±7.83 mm Hg vs 172.23±11.84/117.03±6.62mm Hg,P<0.05）降低,与N→SHR组相比,NT-pro BNP、CRP水平（NT-pro BNP:331.27±57.83 vs 460.55±63.96ng/L,CRP:41.37±8.27 vs 67.10±9.30μg/ml,,P<0.05）降低,杜仲-刺蒺藜药对中剂量组特征菌属Anaeroplasma所属的Mollicutes（柔膜菌纲）在受体鼠被检测到。结论:老年高血压病与功能性胃肠病均存在气虚、血瘀、痰浊的病理状态,导师在治疗中从肝脾肾入手,以补肾健脾,活血理气药为主,杜仲刺蒺藜为常用药对。在动物实验中,杜仲-刺蒺藜药对显着降低老龄SHR大鼠血压、降低炎症水平,且杜仲刺蒺藜在维持肠道菌群多样性方面优于缬沙坦,其降压机制与肠道菌群的组成和多样性的改变相关。与高血压相关的菌种、与杜仲-刺蒺藜发挥降压效用相关菌种可通过粪菌移植至受体鼠。
张韵[4]（2019）在《GnRH通过GnRHR-Ras-MAPK通路对大鼠星形胶质细胞GnIH、kisspeptin表达的调节》文中研究说明促性腺激素释放激素（gonadotropin-releasing hormone,GnRH）主要是由下丘脑GnRH神经元合成和分泌,通过垂体门脉系统到达垂体,作用于垂体促性腺激素分泌细胞,促进黄体生成素LH和促卵泡素FSH的合成和分泌,进而调节外周靶性腺类固醇激素的产生,形成调控生殖器官发育和配子生成的下丘脑-垂体-性腺轴（Hypothalamic-pituitary-gonadal axis,HPG）。星形胶质细胞（Astrocyte,AST）是脑内分布最广,数量最多的一类细胞。它们连续地分布于整个中枢神经系统,有着支撑、提供营养、免疫等多样的生物学功能。本课题组前期实验证明星形胶质细胞表达GnRH受体（Gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRHR）,GnRH通过与GnRHR结合,作用于MAPK调节星形胶质细胞PGE2、TNF-α等细胞因子的表达。同时,另有研究表明,星形胶质细胞可以通过分泌GnIH（gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH）负向,kisspeptin正向调节下丘脑GnRH的合成和分泌。因此,本实验通过体外培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞,研究GnRH是否通过GnRHR-Ras-MAPK路径调节GnIH和kisspeptin的表达,找到GnRH通过星形胶质细胞反馈调控下丘脑GnRH神经元新的分子路径,阐明下丘脑GnRH合成和分泌的反馈调控新机制。其主要研究内容为:（1）体外条件下,GnRH对星形胶质细胞细胞活性的影响;（2）GnRH对星形胶质细胞GnIH、kisspeptin表达的影响;（3）GnRHR-Ras-MAPK通路在GnRH调节星形胶质细胞GnIH和kisspeptin表达中的作用。具体如下:（1）实验选取出生13d的SD大鼠乳鼠,分离下丘脑,体外培养原代和传代星形胶质细胞。待细胞长到特定形态,表达特异性标记蛋白胶质纤维酸性蛋白（Glial fibrillary acidic protein,GFAP）时。经多次纯化达到纯度为95%以上,为后续试验提供基础。（2）为探索不同浓度的GnRH刺激是否能够影响星形胶质细胞细胞活性。实验选取浓度分别为10-12 mol/L、10-10 mol/L、10-8 mol/L、10-66 mol/L的GnRH来刺激体外培养的活性无差异的星形胶质细胞,作用时间为1h、4 h、8 h、12 h、24 h。后续用CCK-8法检测星形胶质细胞活性。结果显示,浓度为10-10 mol/L的GnRH,作用8h后星形胶质细胞活性得到显着提高。（3）为探索不同浓度的GnRH刺激是否能够影响星形胶质细胞GnIH、kisspeptin的表达。实验选取浓度分别为10-12 mol/L、10-10 mol/L、10-8 mol/L、10-66 mol/L的GnRH来刺激体外培养的星形胶质细胞,作用时间为1h、4 h、8 h、12 h、24 h。后续用ELISA试剂盒法测定细胞GnIH、kisspeptin的表达水平,用qPCR测定细胞GnIH、kisspeptin mRNA表达水平。结果显示,浓度为10-10 mol/L的GnRH,作用8h后GnIH、kisspeptin的表达与对照组相比差异显着（P<0.05）。最后选取的GnRH适宜浓度为10-10 mol/L,作用时间为8h。（4）为了探究GnRHR-Ras-MAPK通路在GnRH调节星形胶质细胞GnIH和kisspeptin表达中的作用。首先筛选适宜的抑制剂浓度。GnRHR与Ras抑制剂浓度均先选取5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L。预处理细胞1h后用浓度为10-10 mol/L的GnRH处理,作用8h。用ELISA试剂盒法测定培养液中GnIH和kisspeptin的表达水平。结果显示,在GnRHR抑制剂的浓度为10μmol/L、Ras抑制剂浓度为20μmol/L时GnIH和kisspeptin的表达水平与对照组相比有较大变化,差异显着（P<0.05）。实验最终选取GnRHR抑制剂浓度为10μmol/L、Ras抑制剂浓度为20μmol/L。参考之前实验,选取p38抑制剂浓度、JNK抑制剂浓度、ERK抑制剂浓度为分别为20μmol/L、20μmol/L、10μmol/L。实验设置分组为空白对照组、GnRH对照组、通路抑制剂组、通路抑制剂+GnRH组,通路抑制剂预处理星形胶质细胞1h后加入浓度为10-10 mol/L的GnRH,再作用8h。用Weston-blot法测定各通路蛋白表达水平或磷酸化水平。用ELISA法测定细胞GnIH和kisspeptin的表达水平。用qPCR法测定细胞GnIH和kisspeptin的mRNA表达水平。结果显示处理后通路蛋白的表达量或磷酸化水平都有显着差异（P<0.05）,并且GnIH和kisspeptin的蛋白表达和mRNA表达也有明显变化,差异显着（P<0.05）。综上所述,本实验可得到以下结论:（1）GnRH影响星形胶质细胞活性,高浓度10-6mol/L的GnRH会抑制细胞活性,低浓度10-12mol/L的会GnRH促进细胞活性。10-10 mol/L的GnRH能有效激活星形胶质细胞,显着提升星形胶质细胞的活性。（2）GnRH调节星形胶质细胞GnIH和kisspeptin的表达,高浓度10-6mol/L的GnRH促进细胞GnIH表达,抑制细胞kisspeptin表达;低浓度10-12mol/L的GnRH抑制细胞GnIH表达,促进细胞kisspeptin表达。10-10 mol/L的GnRH,作用8h后星形胶质细胞中GnIH和kisspeptin的表达变化最为显着。（3）GnRH经GnRHR-Ras-ERK通路调控星形胶质细胞GnIH的表达,经GnRHR-Ras-MAPK调控星形胶质细胞kisspeptin的表达。
李雅珊,孙华[5]（2018）在《亚麻成分提取方法及功效研究综述》文中指出亚麻是有"来自高原的深海鱼油"美称的油料作物,由于含有大量的营养成分而备受关注。其中亚麻酸等成分具有促进人体智力、防止心脑血管硬化、调节植物神经、延长寿命以及抗癌等作用。由于亚麻中含有多种对人体有益成分,如α-亚麻酸、蛋白活性肽、膳食纤维等,使其在食品及药用领域有广阔前景。阐述了亚麻的主要组成成分,并综述了主要有效成分的制取及功能介绍。当前寻找更有效的制取方法及有效利用亚麻成分仍是将来研究的主要方向。
郑绵平,张永生,刘喜方,齐文,孔凡晶,乜贞,贾沁贤,卜令忠,侯献华,王海雷,张震,孔维刚,林勇杰[6]（2016）在《中国盐湖科学技术研究的若干进展与展望》文中研究说明我国拥有得天独厚的盐湖资源,分布于北半球盐湖带欧亚盐湖亚带东部,主要分布在现代降水量<500mm/a的范围内。本文对中国盐湖科学技术60年来取得的若干进展进行初步梳理。1.在盐湖沉积与古气候、古环境研究方面:提出了各种盐类矿物的古气候转换指标。柴达木西部-塔里木东部氯化物型-硫酸盐型沉积区为我国第四纪以来干旱成盐中心,历经了6次以上的向外干旱（成盐）扩张期;提出青藏高原第四纪晚期存在5次泛湖高湖面;2.在盐湖成矿与成盐成钾理论研究方面:首编青藏高原湖泊水化学分带图（1/250万）,揭示了青藏高原盐湖水化学类型由南往北、由碳酸盐-氯化物型分布规律及其相应成盐成矿专属性;发现几个大型陆相钾盐矿床,提出了高山深盆成盐模式、链式多级中浅盐湖成矿模式、多级湖盆深盆成盐模式、砂砾型含钾卤水成矿模式以及"隔代承袭成钾"等新认识,建立和发展了"陆相成钾"理论认识;发现青海大柴旦湖钠硼解石-柱硼镁石矿床、西藏扎仓茶卡柱硼镁石-库水硼镁石矿床、聂尔错库水硼镁石矿床等新类型镁硼酸盐（锂）矿床,进而提出冷冻稀释成硼理论新认识。3.自主研发出的"反浮选冷结晶工艺"生产氯化钾自控系统,使察尔汗盐湖钾盐达到300万吨/年KCl产量,形成了名牌钾肥产品。成功研发了罗布泊120万吨/年硫酸钾成套技术,建成世界最大的硫酸钾生产装置,2015年产量达160万吨,以上为我国钾肥生产作出了重大贡献。在自主研发的"冬储卤-冷冻-日晒-分离-盐梯度太阳池积热沉锂"创新技术支撑下,在西藏高原海拔4421米的扎布耶盐湖建成了世界海拔最高的锂盐产业,也是我国首条年产5000吨碳酸锂的盐湖提锂基地。4.根据盐水域发育大面积杜氏藻等嗜盐菌藻、盐沼带和盐碱地繁衍多种盐生植物的盐境生态特点,提出"盐湖农业"（"盐土农业"）农业新概念,发展盐境绿色产业提供新的理念和技术支持。最后,为今后盐类科学发展方向,提出了深绿科技与产业研发方向,随着盐类科学技术的发展,将会促进新的边缘交叉学科盐类学（Salinology）的发展和日臻完善。
陈焱[7]（2015）在《静电纺丝纳米纤维支架诱导iPS细胞心肌分化及机制研究》文中指出【研究背景】在世界范围内,特别是在我国及主要发达国家,心血管疾病已经成为导致患者死亡的首要病因。心脏衰竭、慢性缺血性心肌病与急性心肌梗死是其中三种最常见的死亡原因。到目前为止,临床上对于因功能性心肌细胞损失过多所导致的终末期心脏衰竭,除了心脏移植之外还没有确切的治疗方法。由于供体稀缺和免疫排斥等相关问题,心血管疾病的治疗迫切需要新方法,而基于干细胞和组织工程技术的组织器官再生将是未来研究发展的重点方向。心肌再生需要有种子细胞生成大量同源心肌细胞,这一点已经逐渐成为学者及临床医生们的共识。在各种干细胞中,诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cell,i PSC）被认为是最理想的种子细胞来源。而作为种子细胞生长分化的载体,材料支架是另一至关重要的环节。心肌细胞（Cardiomyocyte,CM）生长在细胞外基质（Extracellular matrix,ECM）的环绕之中,而静电纺丝纳米纤维支架能够做到结构高度类似于天然ECM,从而能够在体外为种子细胞生长分化提供适宜的物理微环境。早期为了解决i PSC向CM分化的效率问题,大多研究集中在使用细胞因子对干细胞进行高效诱导定向分化,应用仿生支架构建人工心肌方面研究很少。在为数不多的人工心肌构建方面的当研究中,大多研究采用的是已分化完成的CMs来与支架共培养,另一些研究则考虑如何将ECM的成份制作为支架或添加到材料支架内以用于CMs的负载培养,而对于仿生纳米纤维支架的物理微环境对于i PSC向CMs分化的作用尚不清楚。支架对干细胞心肌方向分化的影响或作用,正是构建组织工程心肌亟需了解的问题。【目的】研究三维纳米纤维仿生支架的物理微环境对i PSC向CM分化的影响及其机制,为组织工程心肌支架构建提供理论依据。【方法】1)采用静电纺丝技术生产聚己内酯（Poly-（ε-caprolactone）,PCL）纳米纤维,构建具备三维结构的纳米纤维仿生支架。2)评价支架的各项理化性质,并与小鼠胚胎成纤维细胞共培养以评价支架的安全性及细胞相容性。3)携带GFP转基因的Oct4-GFP+小鼠诱导多能干细胞（murine induced pluripotent stem cell,mi PSC）负载到纳米纤维仿生支架上共培养,荧光显微镜直接追踪观察mi PSCs的生长及多能性维持情况,并评估支架用于mi PSC培养的可行性。4)采用单层法（monolayer method）将Oct4-GFP+mi PSCs直接粘附培养在PCL三维纳米纤维支架上,不添加分化诱导剂自发分化,探讨PCL纳米纤维支架对mi PSC向CM分化可能的影响。5)提取总蛋白与不同时间点总m RNA,比较PCL纳米纤维支架与无支架培养对mi PSCs向CM分化的影响,探讨其影响因素。6)特异性调节细胞分化不同阶段的Wnt/β-catenin信号活性,探讨三维PCL纳米纤维支架影响分化可能的分子机制。【结果】1)静电纺丝技术成功制得光滑连续,直径为纳米级别的PCL纤维和PCL/gelatin复合型纤维,并成功构建出孔隙结构丰富的三维立体纳米纤维仿生支架。2)PCL与明胶成份混纺或直接在纤维表面包被明胶,均可以克服材料原有的不利属性,提高细胞亲和粘附能力,证实这种处理后的PCL纳米纤维支架具备良好的细胞相容性,适合生物组织工程应用。3)带有绿色荧光蛋白标记物的Oct4-GFP+mi PSCs在PCL纳米纤维支架上单独培养,一定时间内能够保持细胞干性标志物表达,表明PCL纳米纤维支架可用作基底用于mi PSC的自我更新扩增培养。4)单层法培养mi PSC于PCL纳米纤维支架上,发现mi PSC直接粘附PCL纳米纤维后,不添加外源性诱导因子情况下也能够自发性分化出CM。5)三维PCL纳米纤维的这种促心肌细胞分化的作用明显强于2D培养皿,这种作用与其表面独特物理结构的微观形貌具有密切关系。6)选择性激动剂和抑制剂调节细胞内Wnt/β-catenin信号通路,证实这种纳米纤维支架通过调节mi PSCs内的Wnt/β-catenin信号从而促进CM的分化。综上所述,可以得出结论,三维PCL纳米纤维仿生支架不仅可用于mi PSC扩增培养,而且可通过其提供的物理生物信号调节细胞内Wnt/β-catenin信号活性从而促进mi PSC向心肌细胞的分化。
李姝勤[8]（2015）在《巨噬细胞游走抑制因子缺乏在阿尔茨海默病小鼠模型中减弱tau蛋白的异常过度磷酸化》文中进行了进一步梳理背景:阿尔茨海默病（AD）的病理特征包括β淀粉样蛋白（Aβ）形成的老年斑和tau蛋白异常积聚形成的神经纤维缠结。巨噬细胞游走抑制因子（MIF）是一种促炎细胞因子,参与Aβ聚合物的毒性作用。然而,目前MIF是否影响tau蛋白的异常过度磷酸化仍不清楚。方法:建立两种Mif基因缺失的AD模型小鼠,即Mif基因敲除小鼠（Mif-/-）进行侧脑室（ICV）注射链脲霉素（STZ）和APP/PS1转基因小鼠（APP/PS1+/-）与Mif-/-交配得到APP/PS1+/-Mif-/-小鼠,研究MIF缺失对tau蛋白异常过度磷酸化的影响。采用蛋白质免疫印迹分析法检测小鼠脑内tau蛋白的异常过度磷酸化,免疫荧光染色技术评估ICV-STZ小鼠脑内MIF的表达水平和星形胶质细胞的活性情况。最后采用原代培养神经元及星形胶质细胞,用高糖作用体外模拟STZ的功能,探索MIF影响tau蛋白过度磷酸化的作用机制。结果:MIF缺失能减弱这两种AD小鼠模型脑内tau蛋白的异常磷酸化。侧脑室注射STZ能增加MIF的表达水平,并且MIF在海马能与活化的星形胶质细胞共定位。ICV-STZ还能引起小鼠脑内的星形胶质细胞活化增强,而MIF缺失会减弱ICV-STZ小鼠脑内星形胶质细胞的活化。收集高糖培养的来自野生型（WT）小鼠的星形胶质细胞的条件培养基可引起神经元内tau蛋白的磷酸化水平增加,但MIF缺失的星形胶质细胞却不存在这一效应。MIF或其小分子抑制剂ISO-1均对神经元tau蛋白的磷酸化无直接影响。结论:这些实验结果表明MIF可通过影响星形胶质细胞的活化间接影响tau蛋白的磷酸化水平。抑制MIF或MIF诱导的星形胶质细胞活化可能有助于AD的预防及治疗。
王道[9]（2013）在《不同倍性鱼HPG轴生殖基因的表达及性别决定的机制研究》文中认为下丘脑—垂体—性腺（HPG）轴是鱼类体内重要的神经内分泌系统的调控轴。下丘脑分泌促性腺激素释放激素（GnRH）,刺激脑垂体产生促黄体生成素（LH）和促卵泡激素（FSH）,然后LH和FSH的受体被激活,作用于性腺性类固醇激素合成,促使性腺发育成熟、最终排出精子和卵子。本研究用基因克隆技术、Western Blot技术和RT-PCR技术,以二倍体红鲫、三倍体鱼、四倍体鲫鲤,二倍体团头鲂、三倍体鲫妨、四倍体鲫鲂等多倍体鱼为实验材料,首次对HPG轴中与生殖相关的基因GnRH2、LHβ和FSHβ的表达差异进行了比较研究,获得的主要研究结果如下:1.对不同倍性鲫鲤GnRH2核基因的内含子进行了克隆和序列分析。比较了这四种鱼GnRH2内含子序列之间存在的差异性和共同性,差异性表现在第二内含子序列的长度不同:鲤鱼是545bp,二倍体红鲫是422bp,三倍体鱼是837bp,四倍体鲫鲤是837bp;第三内含子序列的长度不同,鲤鱼是l10bp,二倍体红鲫是120bp,三倍体鱼是128bp,四倍体鲫鲤是128bp。共同性是第二内含子和第三内含,子都是以“GT”起始和“AG”结尾。另外通过子代和父母本的比较,推知子代分别继承了母本和父本的部分基因序列,而且子代还存在新碱基序列的插入,推测子代存在一定程度的异源基因重组,所以子代既继承了父母本的优良性状又比父母本更具多方面的杂交优势。2.比较研究GnRH2基因在不同倍性鲫鲤组织中的表达情况。从mRNA和蛋白水平上看,GnRH2基因在四倍体鲫鲤的中脑、垂体中表达,中脑的表达量要高于垂体,其基因转录翻译主要存在于中脑组织中,并且在GnRH的信号转导通路中起上游重要因子的传递作用,参与调节下游因子促性腺激素等其它激素的释放。用Western Blot技术分析,我们可以知道在繁殖季节GnRH2基因在四倍体鲫鲤中脑的表达水平最高,三倍体鱼最低;而非繁殖季节在三倍体鱼中脑的表达最高。我们推测可能在非繁殖季节,GnRH基因的信号调控异常是存在某种下游信号因子形成一条负反馈信号通路,抑制了 GnRH2基因的正常下调,造成了三倍体鱼性腺出现异常致使不育。3.比较研究GnRH2基因在不同倍性鲫鲂组织中的表达情况。从mRNA和蛋白水平上看,GnRH2基因在四倍体鲫鲂的中脑、垂体中表达,中脑的表达量要高于垂体,其基因转录翻译主要存在于中脑组织中。用Western Blot和RT-PCR技术分析,我们可以知道在繁殖季节GnRH2基因在四倍体鲫鲂中脑的表达水平最高,三倍体鲫鲂最低;而非繁殖季节在三倍体鲫鲂中脑的表达最高。我们推测可能在非繁殖季节,GnRH基因的信号调控异常是存在某种下游信号因子形成一条负反馈信号通路,抑制了 GnRH2基因的正常下调,造成了三倍体鱼性腺败育。4.对异源四倍体鲫鲤的LHβ基因在不同组织和不同发育时期进行表达差异分析。从mRNA和蛋白水平上看,LHβ基因只在四倍体鲫鲤的脑垂体中表达,在其它的组织中几乎不表达。说明LH主要是由腺垂体区的GTH细胞进行分泌。而且通过mRNA水平上对不同发育时期的一龄、二龄、三龄的四倍体鲫鲤的LHβ基因进行表达差异分析,得出LHβ基因在促进配子的发育和性腺最终成熟过程中起重要的作用。另外,在四倍体发育前期就有表达,我们推测与四倍体鱼性成熟年龄提前有关系。5.对异源四倍体鲫鲤的FSHβ基因在不同发育时期进行表达差异分析。通过mRNA和蛋白水平上对不同发育时期的一龄、二龄、三龄的四倍体鲫鲤的FSHβ基因进行表达差异分析,得出FSHβ基因在促进配子的发育和性腺最终成熟过程中起重要的作用。另外,在四倍体发育前期就有表达,我们推测与四倍体鱼性成熟年龄提前有关系。总之,对不同倍性鱼的研究,说明不同倍性鱼GnRH2、LHβ、FSHβ表达存在差异,可能与四倍体可育和三倍体不育有关,证明HPG轴上的相关基因在鱼类生殖发育和繁殖过程的调控起着重要的作用,这为我们以后在低等脊椎动物进行基因的功能研究提供了分子生物学上的理论基础。
谢帝芝[10]（2011）在《重组生长激素酵母饲料的研究》文中提出生长激素（Growth hormone, GH）是脊椎动物脑垂体分泌的促进机体生长发育的单链多肽激素。正常鱼体内生长激素分泌量少,不能满足水产养殖的需要,利用重组DNA技术与大规模培养技术,开展鱼类GH基因工程酵母菌饲料的研究,对鱼类生长激素在养殖中的应用具有重要的科学意义及应用价值。本研究根据GenBank数据库中登记的青鱼（Mylopharyngodon piceus）生长激素基因序列（AF389238）设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增青鱼生长激素（black carp growth hormone, bcGH） cDNA编码区,定向插入含强启动子AOXI的表达载体pPIC3.5k,电击转入毕赤酵母GS115菌株。经甲醇诱导表达,蛋白表达产物的SDS-PAGE和ELISA检测,bcGH在酵母胞内得到正确表达,成功获得重组鱼生长激素酵母（重组bcGH酵母）。250 mL三角瓶中,在pH值6.5、0.5%甲醇、温度30℃和培养时间72 h的诱导条件下,目的蛋白的表达量高达893mg/L。利用正交实验探讨了重组bcGH酵母在豆粕中的发酵条件。结果表明,温度、pH值、培养时间、豆粕浓度、接种量和诱导剂浓度均对生长激素蛋白表达量有影响,在时间96 h, pH6.5,接种量6%,发酵温度30℃,诱导剂浓度1%,豆粕浓度7%等优化条件下,活菌数达到7.96×109cfu/mL, bcGH表达量最高。以重组bcGH酵母发酵豆粕进行鲫鱼生长试验,考察生长性能、血清指标以及IGF基因表达等指标,结果表明,实验组饲料生长性能和血清指标差异明显（p<0.05）,其中相对体重生长率、尿素氮、三碘甲状腺原氨酸T3、甲状腺素、胰岛素水平差异极显着（P<0.01）。肝脏IGF-Ⅰ和IGF-ⅡmRNA相对表达量差异极显着（P<0.01）综上所述,本研究将重组bcGH酵母诱导发酵的豆粕直接添加到鲫鱼基础饲料中,配制成重组bcGH酵母饲料,并将其运用到鱼类养殖上,显着提高了鲫鱼生长性能及其相关基因的表达,为研发绿色、安全、高效的新型微生物渔用配合饲料奠定了基础。
二、脑垂体的制取与保存（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、脑垂体的制取与保存（论文提纲范文）
（1）淡水养殖学实验课程教学体系的改革探索（论文提纲范文）
| 1 目前淡水养殖学课程存在的主要问题 |
| 1.1 对学生实验能力的训练不够系统 |
| 1.2 学生独立思考、探索与创新能力欠缺 |
| 1.3 实验教学方法滞后 |
| 2 实验课程教学体系的构建 |
| 2.1 构建思路 |
| 2.2 实验教学内容 |
| 2.3 实验教学方法 |
| 3 实验教学模式的特色 |
| 3.1 理论教学与实验教学实现了互动 |
| 3.2 明确淡水养殖学实验教学的地位和教学目标 |
| 3.3 加强实践教学环节，提高教学质量 |
| 4 结论 |
（2）好食脉孢菌发酵麸皮制备游离阿魏酸及其改性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 概述 |
| 1.1.1 好食脉孢菌 |
| 1.1.2 小麦麸皮研究 |
| 1.1.3 固态发酵技术 |
| 1.1.4 固态发酵麸皮过程中阿魏酸的释放 |
| 1.1.5 饲料添加剂简介 |
| 1.2 阿魏酸及其衍生物概况 |
| 1.2.1 阿魏酸的性质和来源 |
| 1.2.2 阿魏酸的部分功能与作用 |
| 1.2.3 阿魏酸衍生物简介与常用合成方法 |
| 1.3 脂肪酶与杂化酶 |
| 1.3.1 脂肪酶 |
| 1.3.2 纳米金简介 |
| 1.3.3 酶-纳米金杂化研究 |
| 1.4 论文研究背景目的主要内容 |
| 1.4.1 研究背景及目的 |
| 1.4.2 主要研究内容 |
| 1.5 试验研究创新点 |
| 2 好食脉孢菌发酵麸皮制取游离型阿魏酸的研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 试验材料与方法 |
| 2.2.1 试验材料试剂 |
| 2.2.2 试验仪器设备 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 阿魏酸标准曲线的构建 |
| 2.3.2 阿魏酸酯酶酶活测定 |
| 2.3.3 好食脉孢菌固态发酵 |
| 2.3.4 血球计数法及接种量的确定 |
| 2.3.5 总阿魏酸含量的检测 |
| 2.3.6 游离型阿魏酸的提取 |
| 2.3.7 阿魏酸得率的计算方法 |
| 2.3.8 培养条件优化单因素试验 |
| 2.3.9 正交试验设计 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 单因素试验结果讨论 |
| 2.4.2 正交试验结果 |
| 2.4.3 发酵时间对阿魏酸酯酶酶活的影响 |
| 2.4.4 验证试验 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 固定化脂肪酶催化葡萄糖酯化改性阿魏酸的研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料和仪器 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 主要实验仪器 |
| 3.3 试验方法 |
| 3.3.0 有机反应介质脱水 |
| 3.3.1 脂肪酶催化阿魏酸葡萄糖酯的合成 |
| 3.3.2 阿魏酸转化率的测定 |
| 3.3.3 产物的收集 |
| 3.3.4 阿魏酸葡萄糖酯定性检测方法 |
| 3.4 阿魏酸葡萄糖酯合成反应单因素试验 |
| 3.4.1 反应介质极性的确定 |
| 3.4.2 反应时间对阿魏酸转化率的影响 |
| 3.4.3 反应温度对阿魏酸转化率的影响 |
| 3.4.4 脂肪酶添加量对阿魏酸转化率的影响 |
| 3.4.5 底物酸糖摩尔比对阿魏酸的影响 |
| 3.5 阿魏酸葡萄糖酯合成反应正交试验设计 |
| 3.6 结果与讨论 |
| 3.6.1 阿魏酸葡萄糖酯定性检测结果 |
| 3.6.2 单因素实验结果与讨论 |
| 3.6.3 正交实验设计结果与讨论 |
| 3.6.4 验证试验 |
| 3.7 本章小结 |
| 4 酶-金粒子杂化体系对合成阿魏酸糖酯的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 主要试验材料与设备 |
| 4.2.1 主要试验材料 |
| 4.2.2 主要试验仪器 |
| 4.3 试验方法 |
| 4.3.1 纳米金溶液的制备 |
| 4.3.2 纳米金杂化酶的制备 |
| 4.3.3 纳米金粒径大小对杂化脂肪酶催化效果的影响 |
| 4.3.4 纳米金杂化温度对杂化脂肪酶催化效果的影响 |
| 4.3.5 纳米金杂化时间对杂化脂肪酶催化效果的影响 |
| 4.3.6 纳米金中酶用量对杂化脂肪酶催化效果的影响 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 纳米金溶液紫外光谱分析 |
| 4.4.2 纳米金杂化脂肪酶紫外光谱分析 |
| 4.4.3 红外光谱分析 |
| 4.4.4 纳米金粒径大小对杂化酶催化效果的影响 |
| 4.4.5 纳米金杂化温度对杂化酶催化效果的影响 |
| 4.4.6 纳米金杂化时间对杂化酶催化效果的影响 |
| 4.4.7 纳米金溶液中酶用量对杂化脂肪酶催化效果的影响 |
| 4.4.8 验证试验 |
| 4.4.9 杂化酶与固定化脂肪酶催化反应对比 |
| 4.4.9.1 杂化酶催化反应添加量的确定 |
| 4.4.9.2 杂化酶催化反应时间的确定 |
| 4.4.9.3 杂化酶反应温度的确定 |
| 4.5 本章小结 |
| 5 阿魏酸和阿魏酸葡萄糖酯生物特性研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 试验主要原料及设备 |
| 5.2.1 试验主要原料及试剂 |
| 5.2.2 主要试验设备 |
| 5.3 试验方法 |
| 5.3.1 培养基的制备 |
| 5.3.2 水溶性检测 |
| 5.3.3 清除DPPH自由基能力的测定 |
| 5.3.4 清除羟基自由基能力的测定 |
| 5.3.5 对Fe~(2+)金属离子的螯合作用 |
| 5.3.6 对H_2O_2的清除能力 |
| 5.3.7 抑菌性试验 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 水溶性检测 |
| 5.4.2 清除DPPH自由基能力的测定 |
| 5.4.3 羟自由基清除能力的测定 |
| 5.4.4 对Fe~(2+)金属离子的螯合作用的测定 |
| 5.4.5 对 H_2O_2的清除能力的检测 |
| 5.4.6 抑菌性试验 |
| 5.5 本章小结 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（3）杜仲—刺蒺藜对老龄自发性高血压大鼠肠道微生物组的影响（论文提纲范文）
| 提要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 理论探讨 |
| 1 肠道微生物与高血压 |
| 2 肠道微生物与功能性胃肠病 |
| 3 肠道微生物、“肠-脑轴”在高血压及功能性胃肠病中的作用 |
| 4 中医对高血压的认识 |
| 5 中医对功能性胃肠病的认识 |
| 6 中医对高血压并存功能性胃肠病及肠道内环境改变的认识 |
| 7 中药药效的发挥与肠道菌群关系密切 |
| 8 关于杜仲、刺蒺藜的研究 |
| 第二部分 老年高血压与功能性胃肠病并存的数据挖掘研究 |
| 1 前言 |
| 2 研究对象 |
| 3 诊断标准 |
| 3.1 高血压诊断标准 |
| 3.2 功能性胃肠病诊断标准 |
| 4 纳入与排除标准 |
| 4.1 纳入标准 |
| 4.2 排除标准 |
| 5 研究方法 |
| 5.1 资料收集(信息采集表见附录 1) |
| 5.2 数据处理 |
| 5.3 数据分析 |
| 6 研究结果 |
| 6.1 一般情况 |
| 6.2 证候要素 |
| 6.3 舌苔脉象 |
| 6.4 用药统计结果 |
| 7 讨论 |
| 7.1 四气五味归经分析 |
| 7.2 用药规律分析 |
| 7.3 组方规律分析 |
| 8 结论 |
| 第三部分 杜仲-刺蒺藜药对对老龄高血压大鼠肠道微生物组的影响 |
| 实验一 高血压时肠道微生物的变化及缬沙坦对老龄高血压大鼠肠道微生物组的影响 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 主要仪器与设备 |
| 2.2 主要试剂 |
| 2.3 实验动物饮食成分构成 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 实验前准备 |
| 3.2 分组及干预 |
| 3.3 血压测量方法 |
| 3.4 酶联免疫吸附测定(ELISA)检测 |
| 3.5 形态学观察 |
| 3.6 肠道菌群16srRNA扩增子测序及分析 |
| 3.7 PICRUSt分析 |
| 3.8 统计学方法 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 一般情况 |
| 4.2 清醒SHR大鼠尾动脉压及体质量的变化 |
| 4.3 对大鼠血清学指标的影响 |
| 4.4 对大鼠血管形态学的影响 |
| 4.5 对大鼠肠道微生物组的影响 |
| 5 PICRUSt分析 |
| 6 讨论 |
| 7 结论 |
| 实验二 杜仲-刺蒺藜药对对老龄高血压大鼠肠道微生物组的影响 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 主要仪器与设备 |
| 2.2 主要试剂 |
| 2.3 实验动物饮食成分构成 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 实验材料准备 |
| 3.2 分组及干预 |
| 3.3 血压测量方法 |
| 3.4 酶联免疫吸附测定(ELISA)检测 |
| 3.5 血管形态学观察 |
| 3.7 肠道菌群DNA测序及分析 |
| 3.8 气相色谱质谱法检测 |
| 3.9 统计学方法 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 一般情况 |
| 4.2 对清醒SHR尾动脉压的影响 |
| 4.3 对大鼠血清学指标的影响 |
| 4.4 对大鼠胸主动脉中NF-κB通路重要分子m RNA表达水平的影响 |
| 4.5 大鼠血管形态学变化 |
| 4.6 对大鼠肠道微生物组的影响 |
| 4.7 SCFAs定量检测结果 |
| 4.8 杜仲-刺蒺藜药对中剂量组肠道Anaeroplasma丰度与CRP、NF-κB p65 浓度相关性分析 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 实验三 粪菌移植实验 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料与方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 一般情况 |
| 3.2 对清醒SHR、WKY大鼠尾动脉压的影响 |
| 3.3 对大鼠血清学指标的影响 |
| 3.4 对大鼠血常规、尿常规等指标的影响 |
| 3.5 对大鼠肠道菌群的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 肠道菌群与高血压的研究概况 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读博士期间发表的论文和参与的课题 |
| 查新报告 |
| 发表论文 |
（4）GnRH通过GnRHR-Ras-MAPK通路对大鼠星形胶质细胞GnIH、kisspeptin表达的调节（论文提纲范文）
| 英文缩略词说明 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 GnRH研究进展 |
| 1.1.1 GnRH |
| 1.1.2 GnRHR |
| 1.1.3 GnRH类似物 |
| 1.2 GnIH与 kisspeptin研究进展 |
| 1.2.1 GnIH |
| 1.2.2 Kisspeptin |
| 1.3 星形胶质细胞的研究进展 |
| 1.3.1 星形胶质细胞活化及功能 |
| 1.3.2 星形胶质细胞与GnRH神经元之间的相互作用 |
| 1.4 GnRHR-Ras-MAPK通路 |
| 1.5 小结 |
| 第2章 引言 |
| 第3章 实验材料和方法 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验动物 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 实验耗材 |
| 3.1.4 实验仪器 |
| 3.1.5 试剂配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 星形胶质细胞培养方法 |
| 3.2.2 星形胶质细胞免疫荧光鉴定 |
| 3.2.3 GnRH对星形胶质细胞活性的影响 |
| 3.2.4 GnRH对星形胶质细胞GnIH、kisspeptin表达的影响 |
| 3.2.5 GnRHR-Ras-MAPK通路参与GnRH调节星形胶质细胞分泌GnIH、kisspeptin的分子机制 |
| 第4章 结果与分析 |
| 4.1 星形胶质细胞的培养 |
| 4.1.1 星形胶质细胞原代培养 |
| 4.1.2 星形胶质细胞的传代培养 |
| 4.1.3 星形胶质细胞的鉴定 |
| 4.2 不同浓度的GnRH作用不同时间对星形胶质细胞活性的影响 |
| 4.3 不同浓度的GnRH作用不同时间对星形胶质细胞GnIH、kisspeptin表达的影响 |
| 4.3.1 不同浓度的GnRH作用不同时间对星形胶质细胞GnIH表达的影响 |
| 4.3.2 不同浓度的GnRH作用不同时间对星形胶质细胞kisspeptin表达的影响 |
| 4.4 GnRHR-Ras-MAPK通路在GnRH影响星形胶质细胞GnIH、kisspeptin表达中的作用 |
| 4.4.1 GnRHR抑制剂对星形胶质细胞GnIH、kisspeptin表达的影响 |
| 4.4.2 Ras抑制剂对星形胶质细胞GnIH、kisspeptin表达的影响 |
| 4.4.3 MAPK抑制剂对星形胶质细胞GnIH、kisspeptin表达的影响 |
| 第5章 讨论 |
| 5.1 星型胶质细胞的培养 |
| 5.2 GnRH对星形胶质细胞活性的影响 |
| 5.3 GnRHR-Ras-MAPK通路对GnRH影响星形胶质细胞GnIH、kisspeptin的表达的影响 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的文章 |
（5）亚麻成分提取方法及功效研究综述（论文提纲范文）
| 1 亚麻籽主要组成成分及功效研究 |
| 1.1 亚麻籽组成成分 |
| 1.2 亚麻籽功效研究 |
| 1.2.1 降压降脂 |
| 1.2.2 抑菌 |
| 1.2.3 抗癌 |
| 2 亚麻籽中有效成分的提取方法及成分分析 |
| 2.1 亚麻籽油 |
| 2.1.1 提取 |
| 2.1.2 成分分析 |
| 2.2 亚麻酸 |
| 2.2.1 提取 |
| 2.2.2 成分分析 |
| 2.3 亚麻多糖 |
| 2.3.1 提取 |
| 2.3.2 纯化 |
| 2.3.3 成分分析 |
| 2.4 木酚素 |
| 2.4.1 提取分离 |
| 2.4.2 成分分析 |
| 2.5 蛋白质及活性肽 |
| 2.6 膳食纤维及亚麻胶 |
| 2.7 维生素 |
| 2.8 矿物质 |
| 2.9 其他 |
| 2.9.1 生氰糖甙 |
| 2.9.2 渣粕 |
| 2.9.3 纤维素 |
| 2.9.4 色素 |
| 3 应用及展望 |
（7）静电纺丝纳米纤维支架诱导iPS细胞心肌分化及机制研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 实验一 纳米纤维支架的构建及其性质研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 纳米纤维支架诱导MIPSC向心肌细胞分化 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三 纳米纤维支架促进MIPSC向心肌细胞分化的机制探讨 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（8）巨噬细胞游走抑制因子缺乏在阿尔茨海默病小鼠模型中减弱tau蛋白的异常过度磷酸化（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 第一章 绪论 |
| 1 阿尔茨海默病 |
| 1.1 阿尔茨海默病概述 |
| 1.2 微管相关蛋白—Tau蛋白 |
| 1.3 阿尔茨海默病与星形胶质细胞 |
| 2 巨噬细胞游走抑制因子 |
| 2.1 巨噬细胞游走抑制因子概述 |
| 2.2 巨噬细胞游走抑制因子在AD中的研究现状 |
| 3 选题意义与研究内容 |
| 3.1 选题意义 |
| 3.2 研究内容 |
| 第二章 小鼠AD模型的建立和ICV小鼠模型体重监测 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 材料与试剂 |
| 1.2 实验溶液 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 数据处理软件 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物饲养 |
| 2.2 ICV-STZ小鼠AD模型的建立 |
| 2.3 ICV注射小鼠的体重监测 |
| 2.4 MIF基因敲除的APP/PS1双转基因小鼠的产生 |
| 2.5 小鼠基因型鉴定 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 MIF敲除可逆转ICV-STZ小鼠体重减轻 |
| 3.2 配种产生MIF基因敲除的APP/PS1双转基因小鼠 |
| 4 小结与讨论 |
| 第三章 MIF参与tau蛋白的异常过度磷酸化 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 材料与试剂 |
| 1.2 实验溶液 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 数据处理软件 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 小鼠脑组织蛋白液和冰冻切片制备的前处理 |
| 2.2 小鼠脑组织蛋白液的定量和制取 |
| 2.3 蛋白质免疫印迹分析法 |
| 2.4 小鼠脑冰冻切片的制备 |
| 2.5 冰冻切片免疫荧光染色法 |
| 2.6 定量分析与统计 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 MIF敲除引起ICV-STZ诱导的tau蛋白磷酸化水平降低 |
| 3.2 MIF缺乏降低APP/PS1双转基因小鼠的tau蛋白磷酸化水平 |
| 4 小结与讨论 |
| 第四章 MIF参与星形胶质细胞活化形成的神经炎症 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 材料与试剂 |
| 1.2 实验溶液 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 数据处理软件 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 免疫荧光技术与共定位检测 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 MIF在AD小鼠脑内表达升高并与活化的星形胶质细胞共定位 |
| 3.2 MIF基因敲除减弱ICV-STZ小鼠的星形胶质细胞活化 |
| 4 小结与讨论 |
| 第五章 MIF通过介导星形胶质细胞活化间接调节tau蛋白的过度磷酸化 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 材料与试剂 |
| 1.2 实验溶液 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 数据处理软件 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 原代神经元的分离与培养 |
| 2.2 原代星形胶质细胞的分离与培养 |
| 2.3 条件培养基收集与细胞给药 |
| 2.4 细胞蛋白质免疫印迹分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 MIF对神经元tau蛋白的磷酸化无直接作用 |
| 3.2 星形胶质细胞在高糖环境下能活化 |
| 3.3 MIF通过星形胶质细胞活化引起神经元内tau蛋白的磷酸化水平增加 |
| 4 小结与讨论 |
| 第六章 MIF参与tau蛋白磷酸化调节的分子机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 材料与试剂 |
| 1.2 实验溶液 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 数据处理软件 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 蛋白质免疫印迹分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 胰岛素/IGF-1 信号通路不参与MIF对tau蛋白磷酸化的调节 |
| 3.2 ERK1/2、JNK可能参与MIF调节的tau蛋白磷酸化 |
| 4 小结与讨论 |
| 第七章 讨论与结论 |
| 1 讨论 |
| 2 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间主要研究成果 |
| 参加科研项目 |
| 发表或接收的论文 |
| 基金资助项目 |
（9）不同倍性鱼HPG轴生殖基因的表达及性别决定的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1. 异源四倍体鲫鲤及三倍体鱼的形成及主要生物学特性 |
| 1.1 异源四倍体鲫鲤的形成及主要生物学特性 |
| 1.2 三倍体鱼的形成及主要生物学特性 |
| 1.3 异源四倍体鲫鲤、三倍体鱼获得的生物学意义 |
| 2. 四倍体鲫鲂及三倍体鲫鲂的形成及主要生物学特性 |
| 2.1 四倍体鲫鲂和三倍体鲫鲂的形成及主要生物学特性 |
| 2.2 四倍体鲫鲂、三倍体鲫鲂获得的生物学意义 |
| 3. 促性腺激素释放激素的研究进展 |
| 3.1 GnRH的结构 |
| 3.2 GnRH的生物学功能 |
| 3.3 GnRH与GnRH受体的作用机制 |
| 4. 促黄体激素的研究进展 |
| 4.1 LH的分子结构及LH受体 |
| 4.2 LH的生物学功能 |
| 5. 促卵泡激素的研究进展 |
| 5.1 FSH的分子结构 |
| 5.2 FSH的生物学功能 |
| 5.3 FSH受体及作用机制 |
| 6. 鱼类性别决定的研究进展 |
| 7. 性腺发育与神经内分泌调节的研究进展 |
| 8. 本研究的目的和意义 |
| 第二章 不同倍性鲫鲤GnRH2内含子序列的克隆及遗传分析 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 不同倍性鱼GnRH2核基因的克隆结果 |
| 2.2 不同倍性鱼GnRH2基因的内含子序列结果 |
| 2.3 同源性分析 |
| 2.4 进化树分析 |
| 3. 讨论 |
| 第三章 GnRH2在不同倍性鲫鲤组织中的表达差异研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 GnRH2基因在四倍体鱼不同组织中的mRNA水平的表达 |
| 2.2 GnRH2基因在四倍体鱼不同组织中的蛋白质水平的表达 |
| 2.3 GnRH2基因在不同倍性鱼中的蛋白质水平的表达 |
| 3. 讨论 |
| 第四章 GnRH2在不同倍性鲫鲂组织中的表达差异研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 GnRH2基因在四倍体鱼不同组织中的mRNA水平的表达 |
| 2.2 GnRH2基因在四倍体鱼不同组织中的蛋白质水平的表达 |
| 2.3 GnRH2基因在不同倍性鱼中的mRNA水平的表达 |
| 2.4 GnRH2基因在不同倍性鱼中的蛋白水平的表达 |
| 3. 讨论 |
| 第五章 LHβ在四倍体鲫鲤不同组织和不同发育时期的表达差异研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 LHβ基因在四倍体鱼不同组织中的mRNA水平的表达 |
| 2.2 LHβ基因在四倍体鱼不同组织中蛋白水平的表达 |
| 2.3 LHβ基因在四倍体鱼不同发育时期中mRNA水平的表达 |
| 3. 讨论 |
| 第六章 FSHβ在四倍体鲫鲤不同发育时期中的表达差异研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2. 实验结果 |
| 2.1 FSHβ基因在四倍体鱼不同发育时期中mRNA水平的表达 |
| 2.2 FSHβ基因在四倍体鱼不同发育时期中的蛋白水平的表达 |
| 3. 讨论 |
| 第七章 总结 |
| 参考文献 |
| 硕博学习期间撰写、发表的主要论文及获奖情况 |
| 致谢 |
（10）重组生长激素酵母饲料的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 前言 |
| 2 生长激素研究进展 |
| 2.1 生长激素作用机理 |
| 2.2 生长激素的生理功能研究 |
| 2.2.1 促生长作用 |
| 2.2.2 对物质代谢的影响 |
| 2.2.3 对生殖生理的影响 |
| 2.2.4 对免疫功能的影响 |
| 2.2.5 其它作用 |
| 2.3 影响生长激素分泌的因素 |
| 3 生长激素基因工程菌研究进展 |
| 3.1 生长激素基因工程菌的构建及表达研究 |
| 3.1.1 生长激素基因在大肠杆菌中表达 |
| 3.1.2 生长激素基因在酵母中表达 |
| 3.1.3 生长激素在其它表达系统中的表达 |
| 3.2 外源生长激素的吸收机理 |
| 3.3 生长激素基因工程菌安全性评价 |
| 3.3.1 外源生长激素残留问题 |
| 3.3.2 诱导剂的副作用 |
| 3.4 生长激素基因工程菌的应用 |
| 4 研究目的和意义 |
| 第二章 重组生长激素酵母的构建 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 菌株和质粒 |
| 1.1.3 主要药品和试剂 |
| 1.1.4 培养基 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 引物设计 |
| 1.2.2 青鱼脑垂体总RNA提取 |
| 1.2.3 cDNA第一链的合成 |
| 1.2.4 青鱼GH-cDNA克隆 |
| 1.2.5 pPIC3.5K-bcGH表达载体的构建 |
| 1.2.6 转化酵母细胞 |
| 1.2.7 多拷贝转化子的筛选及鉴定 |
| 1.2.8 重组酵母诱导表达和考染检测 |
| 1.2.9 蛋白纯化及Elisa鉴定 |
| 1.2.10 目的蛋白定量检测 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 脑垂体总RNA提取结果 |
| 2.2 青鱼生长激素cDNA片段扩增 |
| 2.3 重组表达载体pPIC3.5K-bcGH的构建与鉴定 |
| 2.4 重组酵母的获得与鉴定 |
| 2.5 表达产物的鉴定及其表达条件优化 |
| 2.6 表达产物纯化及ELISA鉴定 |
| 2.7 目的蛋白含量测定 |
| 3 讨论 |
| 第三章 重组生长激素酵母液态发酵条件的研究 |
| 1 材料与试剂 |
| 1.1 菌株 |
| 1.2 主要药品与试剂 |
| 1.3 培养基 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 种子培养方法 |
| 2.2 发酵培养方法 |
| 2.3 10L发酵罐发酵 |
| 2.4 活菌数和bcGH表达量的检测 |
| 2.4.1 YPD平板计数法检测 |
| 2.4.2 SDS-PAGE电泳检测 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 发酵条件单因素试验 |
| 3.1.1 发酵时间对重组bcGH酵母生长及其表达量的影响 |
| 3.1.2 发酵温度对重组bcGH酵母生长及其表达量的影响 |
| 3.1.3 接种量对重组bcGH酵母生长及其表达量的影响 |
| 3.1.4 豆粕浓度对重组bcGH酵母生长及其表达量的影响 |
| 3.1.5 诱导剂浓度对重组bcGH酵母生长及其表达量的影响 |
| 3.1.6 pH值对重组bcGH酵母生长及其表达量的影响 |
| 3.2 发酵条件多因子正交试验 |
| 3.2.1 发酵因素与水平的确定 |
| 3.2.2 正交试验结果及分析 |
| 3.3 正交试验验证试验 |
| 3.4 10L发酵罐发酵试验结果 |
| 4 讨论 |
| 第四章 重组生长激素酵母饲料促生长作用及其机理的研究 |
| 1 材料与试剂 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试剂 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 试验饲料设计 |
| 2.2 饲养试验 |
| 2.3 指标测定及方法 |
| 2.3.1 生长性能指标 |
| 2.3.2 血清指标 |
| 2.4 引物设计 |
| 2.5 湘云鲫肝脏总RNA制备 |
| 2.5.1 总RNA提取及电泳检测 |
| 2.5.2 总RNA Dnase酶处理 |
| 2.6 IGFs-cDNA片段克隆 |
| 2.7 实时荧光定量PCR |
| 2.8 数据处理 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 对鲫鱼生长性能的影响 |
| 3.2 对鲫鱼血清指标的影响 |
| 3.3 RNA浓度测定及质量鉴定 |
| 3.4 PCR扩增检测 |
| 3.5 对鲫鱼肝脏IGFs mRNA表达影响 |
| 4 讨论 |
| 结论 |
| 创新与后续工作 |
| 参考文献 |
| 英文缩写名词索引 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、脑垂体的制取与保存（论文参考文献）
- [1]淡水养殖学实验课程教学体系的改革探索[J]. 武祥伟,孔令富,荣华,张娟,胡惠永,王晓雯,毕保良. 安徽农业科学, 2021(07)
- [2]好食脉孢菌发酵麸皮制备游离阿魏酸及其改性研究[D]. 高鹏. 哈尔滨商业大学, 2020(10)
- [3]杜仲—刺蒺藜对老龄自发性高血压大鼠肠道微生物组的影响[D]. 亓英姿. 山东中医药大学, 2019(05)
- [4]GnRH通过GnRHR-Ras-MAPK通路对大鼠星形胶质细胞GnIH、kisspeptin表达的调节[D]. 张韵. 西南大学, 2019(01)
- [5]亚麻成分提取方法及功效研究综述[J]. 李雅珊,孙华. 天津科技, 2018(04)
- [6]中国盐湖科学技术研究的若干进展与展望[J]. 郑绵平,张永生,刘喜方,齐文,孔凡晶,乜贞,贾沁贤,卜令忠,侯献华,王海雷,张震,孔维刚,林勇杰. 地质学报, 2016(09)
- [7]静电纺丝纳米纤维支架诱导iPS细胞心肌分化及机制研究[D]. 陈焱. 第四军医大学, 2015(03)
- [8]巨噬细胞游走抑制因子缺乏在阿尔茨海默病小鼠模型中减弱tau蛋白的异常过度磷酸化[D]. 李姝勤. 上海交通大学, 2015(03)
- [9]不同倍性鱼HPG轴生殖基因的表达及性别决定的机制研究[D]. 王道. 湖南师范大学, 2013(01)
- [10]重组生长激素酵母饲料的研究[D]. 谢帝芝. 湖南农业大学, 2011(04)