一、中低温保存羊膜在复杂眼表疾病中的应用（论文文献综述）
杜小东[1]（2016）在《探索新鲜羊膜促进伤口愈合的最佳保存方法和保存时间》文中认为目的：本实验随机选取健康的剖宫产妇（年龄25-35岁）3名,产前母体均行血清学检查,排除人类免疫缺陷性病毒（HIV）、乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）、巨细胞病毒、疱疹病毒、弓形体、梅毒及其他传染病。无菌条件下分离获取产妇羊膜,灭菌处理后以纯甘油、无水酒精和50%DMEM培养基三种不同的方式保存不同月份,通过羊膜移植实验、HE染色切片及羊膜细胞因子检测研究羊膜在保留生物学功能的同时最佳的保存方法和保存时间。方法：将三种不同保存方式的羊膜不同保存条件下分别保存1-6个月,自羊膜起始保存日,每间隔一个月,取三种保存方式的羊膜对小鼠机械创伤模型进行羊膜移植实验,比较不同保存方式的羊膜保存不同月份对小鼠创面的促进愈合效果；在不同的保存月份取三种保存方式的羊膜做HE染色切片,显微镜下观察羊膜细胞随保存时间的延长,羊膜细胞形态的变化；在不同保存月份取等量的三种保存羊膜,无菌条件下溶解羊膜细胞,通过ELISA法检测羊膜在不同保存月份表皮生长因子（EGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（bFGF）及转化生长因子-p1（TGF-β1）的含量,比较三种羊膜保存不同月份对羊膜细胞因子含量水平的影响。结果：羊膜移植小组的小鼠创伤愈合时间相比未做羊膜移植的小鼠明显较短（P<0.05）,无水酒精羊膜组的小鼠创伤愈合时间相比纯甘油羊膜组和50%DMEM培养基羊膜组短（P<0.05）,纯甘油羊膜组的小鼠创伤愈合时间与50%DMEM培养基羊膜组相差较小（P>0.05）。三种保存方式的羊膜,保存一个月,细胞形态基本完整,细胞间隙加大；保存两个月,上皮细胞部分细胞核疏松,海绵层结构疏松,纯甘油组和50%DMEM培养基组羊膜海绵层出现空泡样；保存三个月,上皮细胞部分破裂,细胞核脱失,致密层改变不大,纤维母细胞层和海绵层结构疏松,三种保存羊膜海绵层均出现空泡样,纯甘油组羊膜海绵层部分缺失；保存四个月,细胞间隙再次增大,细胞核脱失情况加剧,海绵层均出现缺失,纯甘油组羊膜上皮细胞层结构不规整；保存五个月,上皮细胞少量缺失,细胞部分坏死,核固缩,羊膜细胞层结构变薄,纯甘油组和无水酒精组羊膜纤维母细胞层部分缺失,50%DMEM培养基组羊膜上皮细胞缺失和坏死情况较严重；保存六个月,纯甘油组羊膜上皮细胞连续中断,纤维母细胞层部分缺失,无水酒精组羊膜上皮细胞层结构疏松,纤维母细胞层大面积脱落,50%DMEM培养基组羊膜上皮细胞固缩坏死,基质层出现空炮样变,基底膜模糊。ELISA法检测三种保存羊膜在不同月份细胞因子含量水平,发现四种细胞因子含量随羊膜保存时间延长而减少。表皮生长因子（EGF）、成纤维细胞生长因子（bFGF）、转化生长因子-β1（TGF-β1）含量均在羊膜保存5月份后下降趋势显着（P<0.05）,血管内皮生长因子（VEGF）含量在羊膜保存2月份后下降趋势显着（P<0.05）,结论：羊膜促进创伤愈合的效果、细胞形态的完整性及细胞因子的含量水平均随保存时间的延长而降低；相同保存时间下无水酒精保存羊膜促进创伤愈合的效果及羊膜结构保存的完整性较纯甘油和50%DMEM培养基保存羊膜要好；三种保存羊膜的细胞因子含量变化整体水平上在保存5个月后下降趋势明显。
郭庆[2]（2017）在《羊膜对角膜损伤的治疗作用及其机理研究》文中研究说明眼表疾病是眼科的常见病、多发病,且复发率高,是眼科主要致盲疾病之一。对于各种眼表疾病所致角膜上皮缺损的治疗,目前以眼表面重建术效果最好,常采用的方法是自体或异体角膜移植术。但自体角膜缘取材有限,并有造成健眼角膜缘干细胞缺乏的风险。异体角膜要求新鲜,且存在来源不足、排斥反应等问题。由于羊膜有其特有的结构特点和促进组织修复的生物学特性,研究者们开始转向以羊膜为原材料治疗眼表疾病的研究中。在对羊膜移植的研究基础上,羊膜的研磨提取液—羊膜匀浆液保留了羊膜中的有效生物成分,在治疗眼表疾病方面取得了一定的进展,是一种较新的尝试。随着生物技术和其他相关技术的发展,以羊膜上皮细胞作为“种子细胞”构建组织工程角膜上皮,在眼表疾病治疗中亦显示出良好的发展前景。本文以羊膜为原材料,从动物实验、临床研究、细胞培养三个层面,研究羊膜移植片、羊膜匀浆液、羊膜上皮细胞对角膜上皮缺损的治疗作用及作用机制,为解决眼表重建材料缺乏及严重眼表疾病的治疗提供新的方法和新的理论依据。首先建立兔角膜上皮损伤的动物模型,行以羊膜移植术,以观察羊膜对动物角膜伤口愈合的作用。结果发现,羊膜移植组与对照组比较,角膜上皮愈合加快,显微形态学观察显示,实验组细胞排列水平、细胞形态、炎症细胞数等方面较对照组均明显改善。其次,在动物实验的基础上,对不同病因所致的眼表上皮缺损患者24人（25眼）,行以羊膜移植术,该临床研究发现:25只眼中21只眼眼表面得以重建,视力有不同程度的提高。再生的角膜上皮透明,结膜组织稳定、无感染。平均观察28.3周,所有21只眼无复发,另外3只眼因并发症致手术失败。再次,以上皮细胞缺损的兔角膜作为研究对象,观察不同浓度羊膜匀浆液对角膜上皮细胞增殖的作用。结果发现,羊膜匀浆液对兔角膜上皮细胞增殖和修复具有明显的促进作用,且这种促进作用在一定范围内随浓度增加而增强,即角膜上皮细胞的增殖率对羊膜匀浆液具有浓度依从性。羊膜匀浆组与羊膜移植组比较作用效果相同,但可避免手术并发症。最后,进行羊膜及角膜上皮细胞培养以及二者共同培养的细胞学研究。结果显示:羊膜上皮细胞在原代培养2 h后开始贴壁生长。细胞呈多角形、不规则形,排列呈铺路石样。体外可连续传45代,CK3、CK18、CK19呈阳性表达。流式细胞仪检测CK3、CK18、CK19表达率分别为40.84±3%,47.51±2%和32.41±3%。角膜上皮细胞在培养的第3天时开始爬出,呈多角形,排列均匀。经诱导培养后的羊膜上皮细胞呈多角形、扁平状,细胞体积增大。流式细胞学检测CK3表达率为76.40±0.3%,与诱导前相比有显着差异（P<0.05）,具有统计学意义。综上所述,本文针对羊膜进行了动物实验、临床研究、细胞培养三个层面的研究工作,实验和临床研究均证明了羊膜对角膜上皮缺损的修复具有促进作用,为解决眼表重建材料缺乏及严重眼表疾病的治疗提供了新的途径和方法。
张妍,郭庆,郝杰,许博,孙青[3]（2014）在《羊膜及羊膜匀浆液在眼科学中应用的研究进展》文中指出羊膜应用于医学已有一个多世纪,应用于眼科也有70余年的历史。因种种原因,在很长一段时间里,对羊膜的研究停滞不前,但随着生物医学技术和其它相关技术的发展,羊膜的解剖结构及生物学特性研究得越来越深入。而随着羊膜的解剖和生物学特性日益明确,羊膜在医学和组织工程学中的应用也越来越广泛,并且应用前景广阔。近年来,由于羊膜的诸多解剖和生物学特性符合眼科学发展的需要,羊膜在眼科中的应用也日益广泛,并取得了良好的临床效果。羊膜的研磨提取液-羊膜匀浆液保留了羊膜中的有效生物成分,在治疗眼部疾病方面也取得了一定的进展。国内外关于羊膜及羊膜匀浆的研究文献有很多,为了更深入了解羊膜的特性及其在眼科疾病治疗方面的优势,该文将对羊膜的应用历史、羊膜及羊膜匀浆液的制备及保存、生物学特性及其在眼科学中的应用作一综述。
中国医科大学医学信息学系[4]（2012）在《中国实用眼科杂志2012年第30卷主题词索引》文中研究表明
杜松龄[5]（2010）在《眼表机械性损伤与泪膜及上皮细胞稳定性关系分析》文中提出目的：研究睑内翻倒睫所致的机械性损伤对角、结膜上皮细胞及泪膜稳定性的影响,并对术后的相应改善情况进行分析。方法：临床60例（106眼）睑内翻倒睫患者分三组：先天性睑内翻组（n=41）,老年性睑内翻组（n=45）,瘢痕性睑内翻组（n=20）,所有患者术前、术后1周及术后1个月分别行泪液分泌试验（schirmer test I, STI）、泪膜破裂时间（tear break-up time, BUT）、角膜荧光素染色（cornea fluorescein staining, CFS）及结膜印记细胞学（conjunctival impression cytology, CIC）检查（根据Nelson分级）,分别对比手术前后的泪膜功能状态,杯状细胞密度及结膜上皮细胞鳞状化生程度。结果：（1）与术前相比较,三组睑内翻倒睫患者行矫正手术后1周及1个月的泪液分泌量无明显变化（P>0.05）。（2）三组睑内翻倒睫患者行矫正手术后与术前比较BUT明显延长,差异均有显着性统计学意义（P＜0.05）。以术后1周及1个月的实验结果观察,相对于瘢痕性睑内翻组的泪膜破裂时间（6.02±3.43s；6.34±6.86s）来说,老年性睑内翻组（8.95±3.75s：9.43±2.67s）及先天性睑内翻组（9.20±7.35s：10.01±3.32s）较长。（3）通过三组患者手术前、后角膜荧光染色比较可以看出,各组睑内翻倒睫患者行矫正手术后,角膜荧光素着色减轻甚至消失,角膜荧光素染色评分的均值均下降,绝大部分患者角膜恢复光滑透明,差异均有显着性统计学意义（P<0.05）。（4）先天性和老年性睑内翻患者术后的鳞状化生程度都有不同程度的降低,杯状细胞密度亦明显增加,有显着性意义（P<0.05）。瘢痕性睑内翻患者术后鳞状化生程度有所降低（P<0.05），但杯状细胞密度无明显增加（P＞0.05）。结论：睑内翻倒睫所致的眼表机械性损伤可导致结膜上皮细胞鳞状化生,杯状细胞数量减少及泪膜稳定性下降；及时且有效的睑内翻倒睫矫正术可明显改善上述情况；相对于瘢痕性睑内翻来说,先天性睑内翻及老年性睑内翻矫正术后眼表功能恢复情况更好。
魏庆华[6]（2009）在《生物羊膜在兔非穿透性小梁切除术中的实验研究》文中提出目的:探讨生物羊膜植入在兔非穿透性小梁切除术中的抗纤维增殖能力,并进行对比研究。方法:15只成年健康新西兰大白兔,雌雄兼顾,每只白兔双眼均行非穿透小梁切除术,术中随机选取一眼,将4mm×12mm生物羊膜植入巩膜瓣和结膜瓣下为实验组,另一眼不植入羊膜为对照组。术后3天、1周、2周、3周观察术眼眼压、滤过泡形态、角膜、结膜、前房情况及眼底情况。于术后1周、2周、3周随机各选取5只兔子处死,抽取房水,观察有无炎性成分;摘除眼球（完整保留滤过泡部分）,取术眼手术部位组织,用固定液固定,作（hematoxylin eosin HE）染色于光镜下观察滤过道开放、纤维增殖、炎性反应情况;作醋酸铀、枸椽酸铅双染色于透射电镜下观察滤过池成纤维细胞及胶原纤维增殖情况。结果:1)术后3天均为功能性滤过泡,结膜及前房反应轻微,角膜上皮染色未见异常,角膜内皮细胞形态定量分析较术前无明显差别,两组眼压均低于术前,组间差异不大。2)术后1周,实验组有14只眼见弥散的滤过泡,轻微隆起,可见微小囊状空腔;对照组有11只眼见滤过泡,滤过泡平复,弥散,有微小囊状空腔,两组差异无统计学意义（p>0.05）。角膜内皮细胞、眼压及眼底情况无明显差异,房水内均未检测到炎性成分。3)术后2周,实验组滤过泡有8只眼,滤过泡明显隆起,弥散;对照组滤过泡有3只眼,滤过泡局限,隆起处有瘢痕粘连,两组间差异无统计学意义（p>0.05）。角膜内皮、眼压差异无统计学意义,眼底及房水较前无明显改变。4)术后3周,实验组有4眼滤过泡,滤过泡面积减少,仍微隆起;对照组滤过泡边界模糊,扁平,功能性滤过泡基本消失。5 )病理切片HE染色示:术后1周,实验组滤过间隙大,成纤维细胞少,无增生的纤维组织形成,羊膜胶原纤维支架断裂,其内可见少量炎性细胞浸润;对照组滤过泡间隙存在,巩膜表面成纤维细胞少,炎性细胞浸润少。术后2周,实验组滤过间隙成疏松状,成纤维细胞少,纤维组织增生少,有炎性细胞浸润;对照组滤过间隙逐渐消失,被增生的纤维组织替代,成纤维细胞多。术后3周,实验组滤过泡呈网状,成纤维细胞较少。羊膜碎裂,表面可见炎性细胞浸润;对照组,滤过泡被粗大的增生纤维结缔组织代替,成纤维细胞多。6)电镜观察:术后1周,实验组与对照组细胞超微结构无明显差别,成纤维细胞多数增生活跃,胞体大,胞浆丰富,线粒体、粗面内质网、核糖体等各种细胞器较多。术后2周,对照组成纤维细胞量多,胞体大,胞质丰富,染色体密度高,粗面内质网数目多,囊内充满网状及颗粒状蛋白物质,呈活跃增生状态;实验组成纤维量少,胞体小,胞质稀疏,电子密度高,粗面内质网数目少,增生能力低。术后3周,对照组成纤维细胞数量较前减少,胞体形态缩小,胞质密度降低,粗面内质网数目减少;实验组成纤维细胞数量少,胞质减少,细胞器处于裂解状态,整个细胞呈衰老细胞的表现。7 )各组均未发现角膜水肿、角膜上皮损伤、结膜伤口漏、浅前房等并发症。结论:1)生物羊膜应用于非穿透性小梁切除术中,未见明显并发症的发生,安全可靠。2)生物羊膜在兔眼非穿透性小梁切除术中有抑制成纤维细胞增殖并能促进有效滤过泡的形成,为临床应用提供了动物实验基础。
王欣[7]（2009）在《人羊膜匀浆上清液的体外抗菌特性研究》文中提出背景与目的:羊膜是一种来源方便、取材容易和价格便宜的生物材料,单纯的人羊膜抗原性极低,羊膜移植已成为当今眼表手术的一个热点。其临床主要作用:①加速上皮化;②维持正常上皮表型,减轻炎症反应;③减轻血管化,减少瘢痕形成等以及可能的作用机制也逐渐被人们研究和认识。羊水的抗菌特性曾被很好的证实,但关于羊膜是否具有抗菌特性却少有文献报道,且研究结果不一致。抗菌肽（Antimicrobial Peptides,AMPs）是生物防御系统产生的一类对抗外源性病原体的小分子肽类物质,是天然免疫的重要防御物质。抗菌肽分布极为广泛,几乎在所有的生物种属中均有发现。自上世纪80年代初被首次发现到现在,已经分离出千余种抗菌肽。人源性抗菌肽主要由防御素（human beta defensin,HBD）、cathecidins和histatin三类组成,主要存在于中性粒细胞及皮肤和粘膜的上皮细胞。由于传统抗生素的耐药性问题日趋严重,抗菌肽的药用开发已成为研究热点。2007年King等报道在人胎盘、胎膜和胎盘的绒毛膜滋养层以及羊膜上皮和蜕膜上都有HBD1-3的表达,同时还发现在体外培养的初级滋养层细胞中,HBD2的mRNA表达会随炎症细胞因子IL-1β的诱导而上调。2007年Stock等也证实原代培养的羊膜上皮细胞中存在着HBD1-3的mRNA和蛋白的表达,在10ng/ml的IL-1β诱导刺激后,HBD2 mRNA的增长呈双峰,其中6 h和12 h时分别增长了51倍和67倍,HBD2蛋白的生成在24 h后明显增加。作者认为羊膜生成较强有力的自然抗菌物质可能在防止妊娠感染中发挥重要作用,其中HBD2会随妊娠相关的炎症细胞因子IL-1β的诱导而大量上调。基于上述研究结果,我们认为人羊膜作为生物材料除了具有目前所公认的一些临床作用以外,还应该具有较强的抵抗病原微生物的作用。本实验拟对人羊膜匀浆上清液（human amniotic homogenate supernatant , HAHS）的抗菌特性进行研究,以期对临床羊膜移植手术的移植材料、手术适应证的选择有所指导,探索一种新的治疗眼表感染性疾病的方便有效的手段。方法:1.按照文献报道的方法和纳入标准从健康产妇的胎盘组织获取新鲜羊膜,并制备‘去上皮’羊膜。以金黄色葡萄球菌ATCC25923为测试菌,应用琼脂糖扩散法测定新鲜人羊膜和‘去上皮’羊膜在上皮面向上或是向下时是否都具有体外抗菌活性。2.制备新鲜HAHS,BCA法测定蛋白含量,以经鉴定培养的3个标准菌株、4个临床分离敏感菌株、4个临床分离多重耐药菌株以及3个临床分离真菌菌株为测试菌,采用琼脂糖扩散法测定新鲜HAHS的抗菌谱。3.以金黄色葡萄球菌ATCC25923和大肠杆菌ATCC25922作为测试菌,采用微量肉汤稀释法和菌落计数法分别测定新鲜HAHS对上述2种待测菌的最小抑菌浓度MIC（minimal inhibitory concentration）和最小杀菌浓度MBC（minimal bactericidal concentration）,与眼科临床常用的10种抗生素比较抗菌作用强弱。4.以金黄色葡萄球菌ATCC25923为测试菌,通过比较等量的待测菌液,与不同水平影响因素作用后的等量的HAHS,反应1 h后吸光度值D（600）下降的幅度大小[△D（600）],研究温度、pH值及保存时间对HAHS抗菌活性的影响。5.制作电镜标本,透射电镜下观察HAHS抗菌作用的可能靶点。结果:1、“去上皮”羊膜以两种方向贴附于培养基均无抑菌环产生,边缘有菌落长入覆盖羊膜,HE染色切片证实羊膜上皮细胞刮除完全;而新鲜人羊膜以两种方向贴附均有明显的抑菌环出现,HE染色证实其单层立方上皮细胞完整。2、HAHS对本实验选用的3个标准菌株,4个临床分离敏感菌株,3个临床分离真菌菌株及粪肠球菌临床多重耐药株共11种菌株均有明显抑菌作用,抑菌环明显。而对阴沟杆菌、大肠杆菌和MRSA的临床多重耐药菌株均无明显的抑菌作用。3、以物质的量浓度计,金葡菌ATCC25923组:HAHS的MIC值明显小于氯霉素,与克林霉素相当,大于青霉素、利福平和左氧氟沙星,MBC值不大于5种中任何一种抗生素;大肠杆菌ATCC25922组:HAHS的MIC值小于磺胺醋酰钠和头孢呋辛钠,与妥布霉素相当,大于庆大霉素和诺氟沙星,MBC值也不大于5种中任何一种抗生素。4、以金葡菌ATCC25923为测试菌,在5.0,6.0,7.0,8.0和9.0五个不同pH值条件下,HAHS都具有良好的抗菌作用,各组间抗菌活性未见显着差异;经-20℃,4℃,20℃,37℃及60℃五个不同温度处理后的新鲜HAHS也保持了良好的抗菌作用,各组的抗菌活性无显着差异,而经过80℃处理的新鲜HAHS的抗菌活性较其它各个温度有明显的降低（△D（600）=0.00152,P<0.05）,但仍表现出一定的抗菌作用;我们还分别观察了在4℃和20℃下将新鲜HAHS保存1 d,3 d,7 d,14 d,28 d,56 d后其抗菌活性的变化,结果证实,在两种保存温度下,随着保存时间的延长,HAHS的抗菌活性没有明显变化,保存56 d后（4℃和20℃的△D（600）分别为0.00297和0.00281）,其对金葡菌ATCC25923仍有良好的抗菌作用。5、透射电镜观察发现:对照组大肠杆菌菌体完整、饱满,表面光滑平直,常见分裂现象;经新鲜HAHS作用1 h后的大肠杆菌,细菌干瘪皱缩,粗细不一,长短各异。表面粗糙不平,很难看到分裂相。一端膨大呈棒槌样,胞膜破裂,表面有明显孔洞,细胞内容物外溢。对照组金黄色葡萄球菌为球型,饱满,胞壁胞膜完整,分裂增殖活跃;经新鲜HAHS作用1h后,实验组金黄色葡萄球菌形态不规则,表面粗糙不平,几乎找不到分裂相。胞壁、胞膜上受到严重破坏形成明显孔洞,原生质扩散流出。结论:1、新鲜羊膜及其匀浆上清液具有明确的抗菌作用,‘去上皮’羊膜无抗菌作用,说明羊膜中抗菌活性物质存在于羊膜上皮细胞内。故临床眼表重建手术应尽量采用带上皮的新鲜羊膜。2、HAHS的抗菌谱较广,对于眼部感染常见的G+、G-、真菌甚至多重耐药菌株均有明显的抗菌作用。3、HAHS的抗菌活性明显强于氯霉素和磺胺,与克林霉素、头孢呋辛钠和妥布霉素相当,稍弱于其它5种抗生素;但其杀菌效能却不亚于10种抗生素中的任何一种。HAHS的MBC=MIC,而抗生素的MBC>MIC,说明HAHS的抗菌作用就是直接的杀菌作用。4、HAHS的理化性质十分稳定,易于保存,具备临床应用的条件,可能成为治疗眼表各类感染性疾病的一种便捷有效的方法。5、HAHS的抗菌作用靶点可能为细菌的质膜。
魏庆华,石浔[8]（2009）在《生物羊膜在眼科中的应用》文中进行了进一步梳理羊膜来源于胚胎,是一种透明、无神经、血管和淋巴管且具有韧性的组织。20世纪初,临床上最早应用羊膜于烧伤和溃疡面的修复。只是当时应用的并不是单纯的羊膜,而是含有羊膜的胎膜。随后,羊
董南[9]（2008）在《羊膜移植在眼表疾病中的应用》文中研究表明目的探讨羊膜在眼表疾病中的应用。方法参阅国内外相关文献,分析归纳目前国内外羊膜移植在眼表疾病中的临床应用情况,并加以综述。结果新鲜羊膜与保存羊膜均可有效治疗眼表疾病,使用来自健康剖宫产产妇的羊膜,经过处理移植于眼表,用于眼表一些疾病的治疗。结论羊膜可以广泛的应用于眼表疾病的治疗当中。
弥胜利[10]（2008）在《冻存山羊角膜缘干细胞构造角膜上皮移植及检测研究》文中研究指明角膜上皮完整性的维持依赖于表浅细胞不断脱落和基底层细胞不断增殖来完成,上皮细胞持续不断的水平向心运动和垂直向上运动源于角膜缘基底层的干细胞增殖和分化。因此,角膜缘干细胞对正常角膜生理功能的稳定起重要作用。许多研究报道体外培养角膜缘干细胞构建上皮植片,可以满足临床移植的需要。但是这些报道中,多采用3T3细胞做饲养层促进上皮细胞的增殖,由于3T3细胞是来自胎鼠的成纤维细胞,其在临床应用有将异种动物疾病传播给人类的危险。另外,目前培养角膜缘干细胞用于重建角膜上皮的研究与临床应用,都是在培养结束后就直接应用于临床,需要患者的身体状况与培养结束后细胞的最佳生长状态相吻合,否则,就会导致整个操作和手术失败。如果能够将培养好的角膜缘干细胞在体外保存一定时间,于不同时间根据患者的身体状况,解冻细胞再继续培养,将极大地方便其临床应用与研究。近年来成体干细胞可塑性的报道不断涌现,几乎所有哺乳动物的成体干细胞都具有横向分化潜能。但是角膜缘干细胞体外诱导分化少见报道。本研究从山羊角膜缘干细胞分离、培养入手,系统比较了原代角膜缘干细胞的分离方法,优化了角膜缘干细胞有血清培养体系,建立了角膜缘干细胞无血清培养体系。对分离富集的角膜缘干细胞体外连续传代后,液氮中长期冻存。解冻后,对其干细胞相关特性进行了研究。本研究以人羊膜为载体负载冻存角膜缘干细胞,在无饲养层无血清的培养体系中构建组织工程化角膜上皮,手术移植给角膜缘干细胞缺损模型羊眼表,结合药物使用抑制免疫排斥反应,最后对其移植治疗效果进行综合评价。实验研究主要内容包括:1山羊角膜缘干细胞的分离培养与鉴定研究（1）比较酶消化法与组织块培养法分离山羊角膜缘干细胞上的效率,认为酶消化法在分离所得细胞中干细胞的比例,分离效率,分离细胞增殖活性,以及分离细胞纯度上均优于组织块培养法。（2）筛选不同浓度的IV胶原,以及不同粘附时间,对角膜缘干细胞分离的影响。结果表明:IV胶原最佳粘附浓度为20μg/mL,最佳粘附时间为20min。（3）筛选出EGF和Insulin对角膜缘干细胞增殖影响的最佳作用浓度分别为20ng/mL和10μg/mL,优化了角膜缘干细胞有血清培养体系,建立了角膜缘干细胞无血清无饲养层培养体系,此无血清培养体系已申请国家专利,专利申请号:200710018160.9。（4）角膜缘干细胞最高传至28代,液氮中共冻存角膜缘干细胞6×107,解冻细胞仍然保持了角膜缘干细胞的相关生物学特性。研究中所建立的冻存体系可以满足不同的实验条件下,对角膜缘干细胞的运输、保存和增殖的要求。2山羊角膜缘干细胞体外定向诱导分化研究（1）解冻扩增角膜缘干细胞经1m mol/Lβ-Me预诱导24h后,再用5m mol/Lβ-Me正式诱导18h,改用无血清培养基培养7d,角膜缘干细胞分化为神经样细胞,表达NSE神经细胞标志。（2）解冻扩增角膜缘干细胞经10 u mol 5-氮胞苷诱导48h,用含心肌条件培养基的培养液体外连续培养25d,角膜缘干细胞逐渐聚集生长,最终分化为心肌样细胞,表达α-actin心肌细胞标志蛋白。（3）解冻扩增角膜缘干细胞经50μg/mL抗坏血酸、10m mol/Lβ-磷酸甘油和0.1u mol/L地塞米松联合诱导7d后,部分细胞死亡,部分细胞呈三角形或多角形聚集生长,连续诱导21d后,诱导细胞形成细胞结节,茜素红染色阳性,呈成骨样细胞。（4）解冻扩增角膜缘干细胞经2m mol/L谷氨酰胺、0.01%大豆胰酶抑制剂、10m mol/L烟碱、5ng/ml肝细胞生长因子（HGF）联合诱导,5d后,细胞胞体逐渐变大,继续诱导,细胞开始聚集成团,连续诱导21d后,诱导形成的细胞团Insulin抗体染色呈阳性,呈胰岛样细胞。3山羊组织工程角膜上皮植片的构建移植与检测研究（1）以冻存角膜缘干细胞为种子细胞,用无血清无饲养层培养体系,以去上皮羊膜为载体,体外培养12-14天,成功构建具有与正常角膜相似结构的组织工程角膜上皮。（2）冻存角膜缘干细胞组织工程化角膜上皮移植可重建角膜缘干细胞完全缺失失明病理模型羊眼表。跟踪观察3个月,实验组100%（15/15）形成角膜型上皮（荧光素不着色）;跟踪观察6个月,实验组20%（3/15）角膜上皮基本透明,80%（12/15）部分角膜开始透明;有6只实验组山羊,跟踪观察12个月,33.3%（2/6）成功修复受损角膜,角膜上皮完全透明,66.7%（4/6）部分修复,视力得到一定恢复。而角膜缘干细胞缺失未进行角膜上皮移植的对照组山羊,全部角膜结膜化失明。眼罩蒙蔽正常眼,对另一侧试验眼进行功能性检测,对试验羊进行驱赶,角膜完全修复组山羊能辨别方向正确躲避;病理模型组山羊完全无方向感,不能正确躲避甚至出现撞墙现象。（3）提出了异体移植的角膜缘干细胞修复角膜缘干细胞完全缺失病理模型的机理可能是:外源移植的异体干细胞抑制了自身周围结膜以及血管向中央角膜上皮的生长,协同机体其他来源的前体细胞共同参与完成了角膜上皮的修复过程,实现角膜上皮重建。（4）系统评价了组织工程化人工角膜上皮移植效果,首次通过检测SRY基因的办法,动态监测了供体细胞在受体动物机体中是否长期存在。并且采用酶标仪测定了角膜上皮透光度,此方法操作简单,结果真实可靠,可以在实验动物中很好地评价角膜上皮透光度。
二、中低温保存羊膜在复杂眼表疾病中的应用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、中低温保存羊膜在复杂眼表疾病中的应用（论文提纲范文）
（1）探索新鲜羊膜促进伤口愈合的最佳保存方法和保存时间（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 羊膜简介 |
| 1.2 羊膜的结构 |
| 1.3 羊膜的生物学特性 |
| 1.4 羊膜的制备保存 |
| 1.5 羊膜的应用 |
| 1.5.1 皮肤创伤敷料 |
| 1.5.2 眼表疾病治疗 |
| 1.5.3 妇科应用 |
| 1.5.4 组织工程应用 |
| 1.6 本课题的研究目的及意义 |
| 第二章 实验材料与方法 |
| 2.1羊膜制备保存 |
| 2.1.1 材料来源 |
| 2.1.2 羊膜分离器材 |
| 2.1.3 羊膜保存材料 |
| 2.1.4 羊膜分离保存 |
| 2.2 小鼠羊膜移植 |
| 2.2.1 实验对象 |
| 2.2.2 羊膜移植器材 |
| 2.2.3 小鼠机械创伤模型羊膜移植 |
| 2.3 羊膜形态观察 |
| 2.3.1 HE染色试剂 |
| 2.3.3 羊膜切片制作 |
| 2.4 ELISA双抗夹心法检测不同保存月份羊膜细胞因子含量 |
| 2.4.1 检测原理 |
| 2.4.2 检测试剂及仪器 |
| 2.4.3 羊膜处理 |
| 2.4.4 细胞因子检测 |
| 2.5 统计学方法 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 羊膜移植 |
| 3.2 三种保存方式羊膜促进创面愈合的效果 |
| 3.3 观察三种保存方式的羊膜在不同保存月份的形态变化 |
| 3.4 EGF、BFGF、TGF-B_1及VEGF水平随羊膜保存月份的变化 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
（2）羊膜对角膜损伤的治疗作用及其机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 课题来源 |
| 1.2 课题背景及研究的目的和意义 |
| 1.3 羊膜的特性 |
| 1.3.1 羊膜的组织学特性 |
| 1.3.2 羊膜的免疫学特性 |
| 1.3.3 羊膜的生物学特性 |
| 1.4 羊膜的研究现状及进展 |
| 1.4.1 羊膜的历史应用 |
| 1.4.2 羊膜的基础研究 |
| 1.5 羊膜在眼科的应用及研究进展 |
| 1.5.1 修复角膜上皮缺损 |
| 1.5.2 修复结膜上皮缺损及异常增生 |
| 1.5.3 治疗角巩膜溃疡及穿孔 |
| 1.5.4 角膜移植的辅助性治疗 |
| 1.5.5 眼部复杂化学烧伤的治疗 |
| 1.5.6 青光眼手术中的应用 |
| 1.5.7 屈光手术中的应用 |
| 1.5.8 其他眼病的治疗 |
| 1.6 羊膜在组织工程学中的应用 |
| 1.7 主要研究内容 |
| 第2章 实验材料及方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 羊膜植片的筛选 |
| 2.1.2 实验动物的筛选 |
| 2.1.3 临床治疗病人筛选 |
| 2.1.4 实验试剂 |
| 2.1.5 手术器械 |
| 2.1.6 实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 羊膜植片的制备及保存 |
| 2.2.2 羊膜匀浆的制备及保存 |
| 2.2.3 羊膜匀浆蛋白含量测定及实验溶液制备 |
| 2.2.4 病理标本的取材制备 |
| 2.2.5 羊膜上皮细胞原代及传代培养 |
| 2.2.6 羊膜上皮细胞的检测 |
| 2.2.7 角膜上皮细胞原代培养 |
| 2.2.8 羊膜上皮细胞与角膜上皮细胞共同培养 |
| 2.2.9 诱导后羊膜上皮细胞检测 |
| 2.3 统计学方法 |
| 第3章 羊膜移植治疗兔角膜损伤的研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验分组及动物模型的建立 |
| 3.2.1 实验分组 |
| 3.2.2 角膜损伤模型的建立 |
| 3.3 手术方式及观察指标 |
| 3.4 羊膜移植对兔角膜损伤愈合作用的比较分析 |
| 3.4.1 眼部炎症反应的比较分析 |
| 3.4.2 角膜上皮愈合时间的比较分析 |
| 3.5 羊膜移植术后显微形态学观察比较 |
| 3.5.1 光学显微镜观察比较 |
| 3.5.2 透射电镜观察比较 |
| 3.6 羊膜移植对角膜伤口愈合的影响 |
| 3.6.1 角膜伤口的愈合方式 |
| 3.6.2 生长因子、胶原纤维对角膜伤口愈合的影响 |
| 3.6.3 羊膜的作用及作用机理 |
| 3.6.4 实验结果及机理分析 |
| 3.7 本章小结 |
| 第4章 羊膜移植治疗人眼表疾病的临床研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 临床资料与手术方式 |
| 4.2.1 临床资料 |
| 4.2.2 羊膜植片的取材 |
| 4.2.3 手术方式 |
| 4.2.4 术后处理 |
| 4.3 临床愈后 |
| 4.4 典型病例报告 |
| 4.4.1 病例 1 |
| 4.4.2 病例 7 |
| 4.4.3 病例 19 |
| 4.5 羊膜移植的临床治疗作用及机理分析 |
| 4.5.1 临床愈后机理分析 |
| 4.5.2 手术适应症及手术方式的选择 |
| 4.5.3 术后并发症的预防和处理 |
| 4.5.4 影响愈后的相关因素分析 |
| 4.5.5 羊膜移植术临床应用的限制和不足 |
| 4.6 本章小结 |
| 第5章 羊膜匀浆液治疗兔角膜损伤的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 羊膜匀浆液对兔角膜上皮细胞增殖作用的研究 |
| 5.2.1 实验分组及动物模型制备 |
| 5.2.2 角膜裸区面积的观察测量及细胞增殖率测定 |
| 5.2.3 各组生长速度的比较 |
| 5.3 羊膜匀浆液与羊膜移植对兔角膜损伤修复作用的比较研究 |
| 5.3.1 实验分组及动物模型制备 |
| 5.3.2 角膜裸区面积的观察测量及细胞增殖率测定 |
| 5.3.3 各组生长速度的比较 |
| 5.4 羊膜匀浆液的作用机理及应用前景分析 |
| 5.4.1 羊膜匀浆液的作用及作用机理 |
| 5.4.2 实验结果及机理分析 |
| 5.4.3 羊膜匀浆液在眼科疾病中的应用 |
| 5.4.4 羊膜匀浆液的应用优势及前景 |
| 5.5 本章小结 |
| 第6章 羊膜上皮细胞体外培养及诱导分化研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 羊膜和角膜上皮细胞培养的形态变化及鉴定 |
| 6.2.1 羊膜上皮细胞形态变化 |
| 6.2.2 羊膜上皮细胞的鉴定 |
| 6.2.3 角膜上皮细胞的形态变化 |
| 6.2.4 角膜细胞诱导的羊膜上皮细胞形态变化及鉴定 |
| 6.3 羊膜和角膜上皮细胞培养的相关因素分析 |
| 6.3.1 实验材料选择相关性分析 |
| 6.3.2 羊膜上皮细胞的培养分析 |
| 6.3.3 羊膜上皮细胞的鉴定分析 |
| 6.3.4 角膜上皮细胞的培养分析 |
| 6.3.5 羊膜上皮细胞的诱导分化分析 |
| 6.3.6 本章实验的不足 |
| 6.4 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及其他成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）羊膜及羊膜匀浆液在眼科学中应用的研究进展（论文提纲范文）
| 前言 |
| 1 羊膜及羊膜匀浆液的制备及保存 |
| 1.1 羊膜制备与保存 |
| 1.2 羊膜匀浆的制备与保存 |
| 2羊膜的组织学 |
| 3 羊膜的活性物质及生物学特性 |
| 4羊膜及羊膜匀浆液在眼科疾病中的应用 |
| 4.1角膜缘干细胞缺乏 |
| 4.2角膜溃疡 |
| 4.3翼状胬肉 |
| 4.4青光眼滤过术 |
| 4.5 视网膜移植 |
| 4.6 辅助眼压测量 |
| 4.7 羊膜在眼科组织工程学中的应用 |
| 4.8 羊膜匀浆在眼科中的应用 |
| 5 总结与展望 |
（5）眼表机械性损伤与泪膜及上皮细胞稳定性关系分析（论文提纲范文）
| 内容提要 |
| 中英文缩写对照表 |
| 第1章 综述 |
| 第2章 前言 |
| 第3章 实验材料与方法 |
| 3.1 病例选择 |
| 3.2 病例选取标准 |
| 3.3 材料与试剂 |
| 3.4 相关检查方法及结果判定标准 |
| 3.5 统计分析 |
| 第4章 结果 |
| 4.1 不同矫正手术术式及手术前、后眼睑形态比较 |
| 4.2 眼表功能常用检查结果 |
| 4.3 眼表印记细胞学检查结果 |
| 第5章 讨论 |
| 5.1 睑内翻倒睫的临床分类、发病机制及术式选择 |
| 5.2 眼表泪膜、上皮细胞功能检测及临床意义 |
| 5.3 睑内翻倒睫的眼表机械性损伤机制及矫正术后恢复情况的分析 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
（6）生物羊膜在兔非穿透性小梁切除术中的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 前言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 第3章 结果 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 第6章 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
（7）人羊膜匀浆上清液的体外抗菌特性研究（论文提纲范文）
| 英文缩写词一览表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 论文正文 人羊膜匀浆上清液的体外抗菌特性研究 |
| 前言 |
| 第一部分 新鲜羊膜和‘去上皮’羊膜体外抗菌活性以及人羊膜匀浆上清液抗菌谱的测定 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 新鲜人羊膜匀浆上清液与眼科临床常用抗生素抗菌作用强度比较及温度、pH 和保存时间对其抗菌活性的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 人羊膜匀浆上清液抗菌作用的可能靶点的 电镜观察 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 全文结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 文献综述 抗菌肽应用于临床治疗—障碍与现实性展望 |
| 参考文献 |
| 研究生期间发表论文 |
（8）生物羊膜在眼科中的应用（论文提纲范文）
| 1 羊膜的特点 |
| 2 作用机制 |
| 2.1 促进上皮增生和分化 |
| 2.2 抑制炎症和新生血管 |
| 2.3 抑制纤维化 |
| 3 羊膜的制备与保存 |
| 4 羊膜在眼科中的应用 |
| 4.1 羊膜用于眼表疾病 |
| 4.2 用于青光眼滤过手术 |
| 5 小结 |
（10）冻存山羊角膜缘干细胞构造角膜上皮移植及检测研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 第一章 角膜缘干细胞 |
| 1.1 角膜缘干细胞概念与定位 |
| 1.1.1 角膜缘的组织解剖 |
| 1.1.2 角膜缘干细胞的定位 |
| 1.2 角膜缘干细胞发育分化及迁移过程 |
| 1.3 干细胞微环境 |
| 1.4 角膜缘干细胞的生物学特性 |
| 1.4.1 慢周期性(slow cycling) |
| 1.4.2 自我更新能力 |
| 1.4.3 粘附特性 |
| 1.4.4 角膜缘干细胞的形态结构特征 |
| 1.4.5 角膜缘干细胞相关标志 |
| 1.4.6 角膜缘干细胞分化标志 |
| 1.5 角膜缘干细胞的分离纯化及鉴定 |
| 1.5.1 获取和培养原代角膜缘干细胞的一般方法 |
| 1.5.2 角膜缘干细胞体外培养体系 |
| 1.5.3 角膜缘干细胞体外培养的载体 |
| 1.5.4 角膜缘干细胞体外培养的形态学及动力学研究方法 |
| 1.5.5 筛选纯化角膜缘干细胞的方法 |
| 1.5.6 体外培养角膜缘干细胞的鉴定方法 |
| 1.6 角膜缘干细胞的超低温冻存 |
| 1.6.1 培养的角膜缘干细胞超低温保存的必要性和可行性 |
| 1.6.2 角膜缘干细胞超低温保存的技术和方法 |
| 1.7 角膜缘干细胞研究中仍需研究的几个问题 |
| 1.7.1 角膜缘干细胞高特异性标志物筛选研究 |
| 1.7.2 角膜缘干细胞微环境研究 |
| 1.7.3 角膜缘干细胞可塑性研究 |
| 1.7.4 角膜缘干细胞超低温冻存体系的优化研究 |
| 第二章 角膜缘干细胞可塑性研究 |
| 2.1 成体干细胞可塑性研究 |
| 2.1.1 成体干细胞可塑性的研究背景及现状 |
| 2.2.2 成体干细胞可塑性分化机制 |
| 2.2 角膜缘干细胞分化潜能与可塑性研究 |
| 2.3 成体干细胞潜在应用前景 |
| 第三章 角膜上皮移植研究 |
| 3.1 角膜移植 |
| 3.1.1 自体角膜缘干细胞移植 |
| 3.1.2 异体角膜缘干细胞移植 |
| 3.1.3 角膜缘干细胞体外培养后移植 |
| 3.2 组织工程化角膜研究的基本问题 |
| 3.2.1 种子细胞 |
| 3.2.2 支架材料 |
| 3.3 羊膜角膜上皮植片的构建移植及检测 |
| 3.3.1 羊膜负载角膜上皮细胞植片的构建 |
| 3.3.2 移植羊膜角膜植片手术和术后护理 |
| 3.3.3 角膜上皮植片移植后效果评价 |
| 3.4 展望 |
| 实验研究 |
| 第四章 山羊角膜缘干细胞的分离培养与鉴定研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 原代山羊角膜缘干细胞分离和富集 |
| 4.2.2 山羊角膜缘干细胞继代培养体系的优化 |
| 4.2.3 山羊角膜缘干细胞在体外冷冻保存 |
| 4.2.4 冻存山羊角膜缘干细胞的生物学特性 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 角膜缘干细胞分离方法探讨 |
| 4.3.2 角膜缘干细胞富集方法探讨 |
| 4.3.3 角膜缘干细胞无血清无饲养层培养体系的建立 |
| 4.3.4 角膜缘干细胞的鉴定方法 |
| 4.3.5 角膜缘干细胞的超低温冻存 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 山羊角膜缘干细胞体外定向诱导分化研究 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 方法 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 山羊角膜缘干细胞向神经细胞分化 |
| 5.2.2 山羊角膜缘干细胞向心肌细胞分化 |
| 5.2.3 山羊角膜缘干细胞向成骨细胞分化 |
| 5.2.4 山羊角膜缘干细胞向胰岛样细胞分化 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 角膜缘干细胞向神经细胞分化 |
| 5.3.2 角膜缘干细胞向心肌细胞分化 |
| 5.3.3 角膜缘干细胞向成骨细胞分化 |
| 5.3.4 角膜缘干细胞向胰岛样细胞分化 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 山羊组织工程角膜上皮植片的构建移植与检测 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 材料 |
| 6.1.2 方法 |
| 6.2 结果 |
| 6.2.1 角膜缘干细胞缺失病理模型山羊眼表特征 |
| 6.2.2 冻存角膜缘干细胞在羊膜上的生长行为及羊膜植片的组织学特征 |
| 6.2.3 角膜上皮移植效果评价 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 冻存角膜缘干细胞无血清培养构建组织工程角膜上皮 |
| 6.3.2 羊膜是负载角膜缘干细胞的理想载体 |
| 6.3.3 人工角膜上皮移植效果评价 |
| 6.4 小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 进一步研究的课题 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、中低温保存羊膜在复杂眼表疾病中的应用（论文参考文献）
- [1]探索新鲜羊膜促进伤口愈合的最佳保存方法和保存时间[D]. 杜小东. 昆明理工大学, 2016(02)
- [2]羊膜对角膜损伤的治疗作用及其机理研究[D]. 郭庆. 哈尔滨工业大学, 2017(01)
- [3]羊膜及羊膜匀浆液在眼科学中应用的研究进展[J]. 张妍,郭庆,郝杰,许博,孙青. 现代生物医学进展, 2014(12)
- [4]中国实用眼科杂志2012年第30卷主题词索引[J]. 中国医科大学医学信息学系. 中国实用眼科杂志, 2012(12)
- [5]眼表机械性损伤与泪膜及上皮细胞稳定性关系分析[D]. 杜松龄. 吉林大学, 2010(10)
- [6]生物羊膜在兔非穿透性小梁切除术中的实验研究[D]. 魏庆华. 南昌大学, 2009(03)
- [7]人羊膜匀浆上清液的体外抗菌特性研究[D]. 王欣. 第三军医大学, 2009(06)
- [8]生物羊膜在眼科中的应用[J]. 魏庆华,石浔. 江西医药, 2009(04)
- [9]羊膜移植在眼表疾病中的应用[J]. 董南. 河南科技大学学报(医学版), 2008(03)
- [10]冻存山羊角膜缘干细胞构造角膜上皮移植及检测研究[D]. 弥胜利. 西北农林科技大学, 2008(12)