一、顺铂对耳蜗单离听觉细胞─氧化氮合酶表达的影响（论文文献综述）
朱蔚杰[1]（2019）在《听力保护活性化合物的筛选及其作用机制探究》文中研究指明听力损失是一种最常见的人类感音性障碍,主要体现为内耳毛细胞的缺失。由于哺乳动物的毛细胞不能够自我再生,毛细胞的缺失可以导致永久性的听力损失。事实上,年龄、噪声、毒性化合物或其他耳毒性药物等影响了全球3.6亿人口的听力水平,最常见的氨基糖苷类抗生素可通过诱导线粒体功能障碍引起耳蜗毛细胞死亡。而截至目前,在临床上并没有针对氨基糖苷类抗生素耳毒性的有效治疗药物。天然产物以其丰富的结构类型和广泛的生物活性成为国内外化学家和药物学家关注的热点,是药物研发中先导化合物和候选药物的重要来源。因此,本研究进行了具有听觉保护作用的天然产物筛选:（1）首先通过毛细胞类似的OC-1细胞体系,筛选并鉴定出对新霉素（Neo）诱导的毛细胞死亡具有保护活性的一类化合物;（2）通过P3小鼠的体外组织培养实验和免疫成像技术,鉴定该类化合物对新霉素诱导耳蜗毛细胞损伤的保护作用;（3）接着,通过成年小鼠体内注射化合物和ABR听功能检测试验,进一步验证化合物对噪声诱导的听力损失及耳蜗毛细胞损失的保护作用;（4）最后,初步探究了该类化合物的结构与听觉保护作用的构效关系。从而,本研究不仅筛选出具有耳蜗毛细胞和听力保护活性的Wech-1类天然活性化合物,而且对其构效关系进行初步探究,为该类化合物作为临床上听力保护药物的进一步研发奠定基础。
马婷婷[2]（2019）在《葛根素对顺铂诱导小鼠耳毒性的防护作用研究》文中提出目的研究葛根素对顺铂诱导小鼠耳毒性的防护作用及其机制,为临床防治顺铂所致耳聋提供新思路。方法1、在体实验100只成年BALB/c小鼠随机分为四组:对照组、顺铂组、顺铂+葛根素组和葛根素组（n=25只）。顺铂组腹腔注射顺铂4.5mg/kg/d,连续5d;葛根素组腹腔注射葛根素200mg/kg/d,连续14d;顺铂+葛根素组先提前腹腔注射葛根素200mg/kg/d,连续9d,在第10d同时腹腔注射顺铂4.5mg/kg/d,连续5d;对照组则腹腔注射等量生理盐水。应用听脑干反应（auditory brainstem response,ABR）测试和耳蜗毛细胞计数,观察小鼠用药前后的听力变化和毛细胞损伤情况;应用免疫荧光染色、蛋白免疫印迹（Western blot）和实时荧光定量PCR（Real-time PCR）等技术检测耳蜗内基质交感分子1（stromal interaction molecule 1,STIM1）、Orai1、瞬时感受器电位香草酸受体1（transient receptor potential vanilloid receptor 1,TRPV1）、钙蛋白酶2（calpain2）的表达。2、离体实验取新生3d BALB/c小鼠耳蜗基底膜,于无血清的新鲜培养基中常规培养24h后,弃去原培养基。将基底膜随机分为4组,对照组给予新鲜无血清培养基2ml;顺铂组给予含有顺铂（16μg/ml）的新鲜无血清培养基2ml;顺铂+葛根素组提前给予10-6M葛根素无血清新鲜培养基培养30min后,加入顺铂（16μg/ml）至2ml;葛根素组给予10-6M葛根素无血清新鲜培养基2ml;各组在同等条件下继续培养24h。利用异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）和罗丹明（tetramethylrhodamineisothiocyanate,TRITC）标记的鬼笔环肽荧光染色方法,观察耳蜗毛细胞形态变化,并统计各组毛细胞数量。应用Western blot技术检测耳蜗毛细胞内STIM1和Orai1蛋白的表达;采用Ca2+荧光探针Fluo-4 AM负载入毛细胞,激光共聚焦显微镜来观察各组耳蜗毛细胞内游离Ca2+水平。结果1.连续给药后,顺铂组ABR阈移与对照组相比明显增大（P<0.01）;顺铂+葛根素组ABR阈移与顺铂组相比明显减小（P<0.01）;葛根素组ABR阈移与对照组相比无显着性差异（P>0.05）。2.在体小鼠耳蜗和离体培养基底膜的毛细胞计数结果均显示,顺铂组外毛细胞缺失率与对照组相比显着增大（P<0.01）;与顺铂组相比,在体实验中顺铂+葛根素组耳蜗基底膜的底回和中回的外毛细胞缺失率明显减少（P<0.01）;离体实验中顺铂+葛根素组与顺铂组相比,外毛细胞和内毛细胞缺失均显着减少（P<0.01）;对照组与葛根素组相比,差异不显着（P>0.05）。3.细胞内Ca2+水平检测结果显示,顺铂组耳蜗毛细胞内的Ca2+水平明显高于对照组（P<0.01）;而顺铂+葛根素组耳蜗毛细胞内Ca2+水平与顺铂组相比显着减弱（P<0.01）;对照组与葛根素组相比荧光强度无明显差异（P>0.05）。4.Real-time PCR结果显示,顺铂组STIM1和Orai1的mRNA水平明显高于对照组（P<0.01）;而顺铂+葛根素组STIM1和Orai1的mRNA水平与顺铂组相比明显降低（P<0.05,P<0.01）;葛根素组的STIM1和Orai1的mRNA表达与对照组相比无明显变化（P>0.05）。5.免疫荧光铺片结果表明,顺铂组STIM1、Orai1的阳性反应与对照组相比显着增强（P<0.01）;顺铂+葛根素组STIM1、Orai1的阳性反应与顺铂组相比明显减弱（P<0.01）;对照组与葛根素组相比无显着性差异（P>0.05）。6.在体与离体实验的Western blot检测结果均表明,顺铂组的STIM1、Orai1表达与对照组相比均明显增强（P<0.01）;顺铂+葛根素组的蛋白表达与顺铂组相比明显减弱（P<0.05）;葛根素组与对照组相比蛋白表达并无明显变化（P>0.05）。7.免疫荧光检测结果显示,顺铂组TRPV1和calpain2蛋白阳性表达明显强于对照组（P<0.01）;顺铂+葛根素组与顺铂组相比阳性表达明显减弱（P<0.01）;而对照组与葛根素组的荧光强度相比无明显变化（P>0.05）。结论葛根素可通过减少STIM1、Orai1、TRPV1和calpain2蛋白表达,抑制耳蜗细胞发生钙超载,从而有效防护顺铂所致小鼠听功能受损。
汪雪玲[3]（2018）在《A666多肽介导主动靶向隐形纳米粒对顺铂耳毒性预防作用研究》文中研究表明目的:耳蜗外毛细胞损伤是导致顺铂引起的听力下降甚至丧失的关键原因。迄今为止,未有被FDA或SFDA批准上市的预防或治疗顺铂耳毒性的药物。本研究着重探讨新型多肽A666修饰,主动靶向外毛细胞药物递送系统作为“靶向定位”、“持续缓释”递送药物的可能性;以地塞米松（dexamathsone,DEX）为模型药物,并进一步以HEI-OC1和顺铂耳毒性豚鼠为体外细胞和体内动物模型,深入研究该主动靶向药物递送系统对顺铂耳毒性的预防作用及潜在作用机制。方法:以马来酰亚胺和单甲氧基末端聚乙二醇-聚乳酸混合物（Mal-PEG-PLA,m PEG-PLA）为载体材料,以DEX为模型药物,采用乳化-溶剂挥发技术优化制备装载有DEX的PEG-PLA隐形纳米粒（DEX-NP）。利用巯基（-SH）与马来酰亚胺基团（-Mal）之间的反应,将末端用赖氨酸修饰的A666多肽与DEX-NP表面PEG末端的马来酰亚胺基团以共价键的方式连接得A666-DEX-NP。该技术新形成的共价键保证抗A666多肽在纳米粒表面修饰的稳定性（不易水解、脱落）。并且可最大限度降低对其构象和活性的影响,以尽可能保护A666与内耳外毛细胞表面高表达的Prestin的识别、结合的能力。采用X射线光电子能谱（XPS）对纳米粒表面进行硫元素分析（S）定性鉴别A666-NP表面A666多肽的成功连接。采用动态光散射测定A666-DEX-NP粒径、Zeta电位,并用透射电镜（TEM）观察其形态和粒径分布,同时采用已有方法测定A666-DEX-NP的包封率、载药量及其体外药物释放特性。用香豆素-6标记多肽A666修饰PEG-PLA纳米粒（A666-coumarin 6-NP）,研究经圆窗膜给药后A666-NP在耳蜗内的分布;测定A666-DEX-NP圆窗膜给药后不同时间点外淋巴液中的地塞米松浓度,明确A666-DEX-NP经圆窗膜给药后的耳蜗分布及释放特征;通过已构建顺铂耳毒性动物豚鼠模型,明确A666-DEX-NP经圆窗膜给药后拮抗顺铂耳毒性的效果;利用分子生物学实验手段对A666-DEX-NP抗顺铂耳毒性作用机制进行了初步研究。结果:通过经典的巯基-氨基化学反应将A666多肽连接到纳米粒表面,XPS分析A666-NP纳米粒表面有0.4%左右的S元素,而NP未检测到S元素,证实A666成功连接。最终获得A666-DEX-NP表面圆整光滑,平均粒径为157.80±14.33 nm,表面电位为-32.53±0.64 m V,包封率为1.20±0.33%,载药量为0.44±0.12%,体外人工淋巴液中缓释长达14 d。香豆素-6示踪A666-NP（A666-coumarin 6-NP）,呈现时间依赖性HEI-OC1细胞内摄取特性;与prestin免疫荧光染色叠合证实A666-prestin相互作用摄取进入细胞。A666-coumarin6-NP经圆窗膜给药1 h后,A666-NP“定位”聚集于外毛细胞;而无多肽修饰NP未观察到外毛细胞定位现象。细胞学实验表明,A666-DEX-NP在20,40,80 mg/ml浓度下显着拮抗顺铂（30μM,24 h）细胞毒性;80 mg/ml浓度下有效抑制顺铂引起细胞凋亡。然而,相同浓度下DEX和DEX-NP并未表现出顺铂细胞毒性抑制和细胞凋亡拮抗作用。A666-DEX-NP经圆窗膜给药后,在内耳淋巴液中持续释放约48 h;而相同剂量的DEX,给药6 h后即被完全清除。由此,A666-DEX-NP体现出优良的“持续”累积释放药物,长时间维持有效药物浓度特性,这为DEX拮抗顺铂引起的听力下降提供了有力保障。基于此,顺铂腹腔注射前1 h,圆窗膜给于A666-DEX-NP,3 d后观察到在4 k Hz,8 k Hz和16 k Hz频率下对豚鼠听力有显着的保护作用,进一步研究证实A666-DEX-NP对顺铂耳毒性保护作用可能是通过抑制caspase-3的活化,增加Bcl-2的表达实现。结论:本研究首次合成制备多肽A666修饰,外毛细胞主动靶向,载DEX的隐形纳米粒（A666-DEX-NP）,并对其体内外“靶向定位”、“持续缓释”特性进行了一系列深入研究。本研究证实是A666-DEX-NP具有良好的外毛细胞靶向特性,是内耳持续递送药物的理想载体,同时,A666-DEX-NP经圆窗膜给药能有效地拮抗顺铂在4 k Hz,8 k Hz和16 k Hz频率下引起的听力下降。该研究为探索顺铂耳毒性预防或治疗策略提供新的思路和策略。
朱丽军[4]（2018）在《补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠耳蜗P38MAPK的影响》文中进行了进一步梳理目的本实验意在评估补肾聪耳方对药物性耳聋大鼠的治疗作用,同时研究该方剂对细胞凋亡信号通路P38MAPK的影响。通过对比三组大鼠的一般状态、体重变化、听力变化、血cAMP和cGMP的改变、耳蜗病理切片以及耳蜗P38蛋白的表达从而整体的评估补肾聪耳方的治疗作用,以期为临床使用补肾聪耳方防治药物性耳聋提供实验室依据。方法将通过ABR听力筛查的SD大鼠（45只）,按照随机数字表法分为3组（空白组、模型组、中药组）,中药组及模型组采用肌肉注射庆大霉素(100 mg·kg-1·d-1)连续14天的方法制造药物性耳聋大鼠模型,中药组在造模的基础上给予补肾聪耳方灌胃,空白组注射并灌胃等量生理盐水。观察三组大鼠一般情况,测量大鼠体重上升的差距,ABR测听力下降幅度。实验第15天取材,测量大鼠血浆cAMP和cGMP含量,使用HE染色法观察大鼠耳蜗病理改变,采用Western-Blot法和RT-PCR法检测大鼠耳蜗P38蛋白的含量。结果（1）一般状态评价模型组及中药组大鼠一般状态出现改变,空白组大鼠表现正常。中药组大鼠与模型组大鼠均出现了躁动不安,容易受到惊吓,怕人怕物,食量明显减少,但饮水增多,体重增长缓慢,大便干,尿量明显减少等一系列表现。但与模型组大鼠相比,中药组大鼠一般状态明显优于模型组。（2）体重增长幅度三组大鼠两周后体重评估,空白组、模型组和中药三组相比,空白组平均体重最高,增长速度最快。空白组与模型组相比,空白组体重增长快（P<0.01）,空白组与中药组相比,空白组体重增长快（P<0.01）,模型组与中药组相比,中药组体重增加较快（P<0.05）。（3）血浆cAMP和cGMP值比较模型组与空白组相比cAMP/cGMP值上升（P<0.05）,中药组与空白组相比cAMP/cGMP值上升（P<0.05）,模型组与中药组相比,模型组cAMP/cGMP值较高P<0.05)。（4）ABR测听比较三组大鼠ABR阈值相比空白组最低,其次是中药组,最后是模型组。空白组与模型组相比其ABR阈值最低（P<0.01）,空白组和中药组相比,其ABR阈值最低（P<0.01）;模型组与中药组相比,中药组ABR阈值较低（P<0.01）。（5）耳蜗病理切片比较空白组大鼠耳蜗切片正常。模型组大鼠和中药组大鼠耳蜗病理切片均出现毛细胞数量减少,排列不规则,螺旋神经节数量减少等情况。但整体上看,中药组病理切片相对模型组较好。（6）耳蜗P38蛋白含量Western-Blot与RT-PCR结果均显示:与模型组和中药组相比,空白组P38蛋白的表达偏低（P<0.05）,而中药组与模型组相比,中药组P38蛋白的表达相对较低（P<0.05）。结论三组大鼠ABR阈值的情况以及病理切片表明,药物性耳聋大鼠模型造模成功,结合大鼠一般状态、体重变化以及cAMP/cGMP值提示模型组与中药组两组大鼠整体状态与中医肾虚证型耳聋相似。中药组大鼠ABR阈值的改善以及耳蜗病理切片结果提示补肾聪耳方对药物性耳聋大鼠有一定的防治作用,因此采用补肾法治疗药物性耳聋方法可行。三组大鼠耳蜗P38蛋白表达提示庆大霉素所致药物性耳聋发病机制可能与开启MAPK细胞凋亡通道有关。而采用补肾聪耳方能有效抑制P38MAPK通道的开启从而对药物性耳聋起到防治作用。
费文彬,江洋,吴展元[5]（2007）在《顺铂耳毒性的研究》文中研究说明
杜波,王苹,付涛,张岩,杜宝东[6]（2007）在《二甲胺四环素对顺铂作用后耳蜗神经元中iNOS表达的影响》文中认为目的探讨二甲胺四环素对顺铂耳蜗神经元毒性的拮抗作用。方法体外培养出生3d的大鼠耳蜗基底膜,分别以顺铂以及顺铂联合二甲胺四环素作用耳蜗基底膜,应用免疫荧光染色方法观察螺旋神经节的变化及免疫蛋白印记方法检测iNOS蛋白表达情况。结果顺铂能够引起耳蜗神经元数目减少约30%,部分神经元形态变小并且不规则。预先应用二甲胺四环素,存活的耳蜗神经元数目明显多于单纯顺铂组;顺铂作用后耳蜗组织中的iNOS蛋白表达和NO含量明显增高（P<0.01）,而联合应用二甲胺四环素,耳蜗组织中的iNOS蛋白表达和NO含量明显降低。结论二甲胺四环素可以通过抑制iNOS蛋白表达而减轻顺铂所致的耳蜗神经元损害。
韩明[7]（2007）在《川芎嗪防护顺铂耳毒性的实验研究》文中指出目的:观察iNOS、Caspase-3在川芎嗪拮抗顺铂耳毒性中作用的表达情况,探讨顺铂耳毒性的致病机制及川芎嗪对顺铂耳毒性的防护作用,为临床预防和治疗顺铂耳毒性提供理论依据。材料与方法:选取耳廓反射正常的50只健康白色红目豚鼠,体重300～400克,雌雄不拘,随机分成三组:对照组、实验组和中药组。对照组（n=10）连续4天腹腔注射生理盐水4ml/kg;实验组（n=20）连续4天腹腔注射顺铂4 mg/kg;中药组（n=20）腹腔注射川芎嗪注射液140mg/kg,连续6天;从第3天起注射川芎嗪30min后再腹腔注射顺铂4mg/kg,连续4天。各组动物均于用药前及停药后测试耳廓反射和听觉脑干诱发电位,比较实验前后听觉脑干诱发电位阈值及各波潜伏期、波幅的变化情况以初步判断听觉功能的改变。随后在麻醉状态下立即断头取耳蜗,根据不同要求将标本分三部分处理。一部分标本用硝酸银进行蜗管内灌注,耳蜗铺片后观察毛细胞损伤情况;一部分标本用4%多聚甲醛固定,脱钙2周后,石蜡包埋,切片,利用免疫组织化学方法测定各组耳蜗内iNOS、Caspase-3的表达情况;另一部分标本用4%戊二醛固定,脱钙,锇酸处理,脱水,包埋,超薄切片,用于透射电镜观察。结果:1.对照组在用药前后未发现异常,体重均有所增加;实验组用药后第二天开始出现活动减少,食欲减退,毛发疏松脱落,体重减轻,精神萎靡,甚至出现死亡;中药组应用顺铂三天后出现上述现象,但程度均较轻。2.耳廓反射:对照组实验前后无差异;实验组明显的下降,且主要影响高频听力;中药组也有下降但程度较轻。3.对照组用药前后ABR阈值及Ⅰ波潜伏期无明显变化;实验组应用顺铂后听阈显着上升,Ⅰ波潜伏期明显延长,与对照组差异明显;中药组用药后ABR阈值及Ⅰ波潜伏期虽然较正常组也有升高,但与实验组比较有显着性差别。4.形态学方面表现为实验组豚鼠耳蜗毛细胞、螺旋神经节细胞变性、坏死、缺失较重,损伤由蜗顶向蜗底逐渐加重,在同一回的3排外毛细胞中又以第一排外毛细胞损伤为重。中药组毛细胞与螺旋神经节也有损伤,但明显轻于实验组;两组毛细胞计数、螺旋神经节计数差异明显。对照组毛细胞排列整齐,螺旋神经节致密,未见明显损失。5.免疫组织化学结果显示iNOS、Caspase-3在对照组耳蜗Corti氏器、螺旋神经节、血管纹等处均无表达;实验组耳蜗Corti氏器和螺旋神经节细胞、血管纹处呈强阳性表达;中药组耳蜗表达呈阳性,但较实验组轻。6.透射电镜结果显示:实验组耳蜗螺旋神经节线粒体减少,结构破坏明显,中药组损伤较实验组轻。结论:1.顺铂可以损伤耳蜗毛细胞、螺旋神经节和血管纹,导致以高频听力丧失为主的听功能的损害。2.实验组耳蜗组织中iNOS表达增高可能与顺铂引起氧化应激损伤有关,Caspase-3的表达增高表明顺铂引起了细胞的凋亡。3.川芎嗪可以通过活血化淤、清除自由基、减轻细胞凋亡等途径对抗顺铂的耳毒性,可以考虑应用川芎嗪来预防和治疗顺铂所致的感音神经性耳聋、耳鸣,有助于肿瘤化疗并发症的防治。
汤勇[8]（2006）在《神经营养因子受体与顺铂诱导的耳蜗细胞毒性的相关性研究》文中进行了进一步梳理本研究通过顺铂耳毒性动物模型的建立,分别观察了顺铂在活体和离体培养中对耳蜗毛细胞及螺旋神经节神经元细胞的毒性作用;应用RT-PCR、免疫组化及Western blot检测TrkB、TrkC、p75及caspase-3在耳蜗的表达情况,从分子和蛋白水平明确在顺铂对耳蜗的毒性作用中它们的动态表达规律;并对caspase-3的表达与听力水平的关系、p75的表达与caspase-3表达之间的关系进行直线回归分析。在国内外首次提出,TrkB、TrkC和p75表达参与顺铂耳毒性耳蜗损伤的病理过程;而且p75参与顺铂中毒性耳聋的螺旋神经节神经元细胞凋亡;在p75介导的顺铂对螺旋神经节神经元的神经毒性作用中,caspase-3参与了下游激活信号。为药物性耳聋的病因学及治疗和预防方面的进一步研究提供理论依据和参照数据。
路虹,杨逸,徐鸥,张迪,韩海霞,于丽萍[9]（2004）在《顺铂对耳蜗螺旋神经节细胞毒性作用及机制》文中研究说明目的通过透射电镜及免疫组化法观察顺铂对耳蜗螺旋神经节细胞的毒性作用。方法16只豚鼠随机均分为2组。顺铂组连续5天腹腔注射顺铂2mg/kg/d;对照组连续5天腹腔注射生理盐水2mg/kg/d;用药前后测试听力,处死动物后制作耳蜗标本,透射电镜观察及免疫组化法测定诱导型一氧化氮合酶（induciblenitricoxidesynthase,iNOS）的表达。结果ABR:顺铂组听力下降明显,阈值显着升高（P<0.01）。透射电镜观察:顺铂组螺旋神经节细胞的细胞器损伤严重,核变形,线粒体肿胀,大量空泡样变,粗面内质网增多,有髓神经纤维的髓鞘增厚;对照组螺旋神经节细胞核无变形,核仁基本居中,线粒体结构正常。免疫组织化学显示:顺铂组螺旋神经节有iNOS阳性反应显色,灰度值降低,iNOS活性升高,与对照组比较,有显着性差异（P<0.01）。结论顺铂可致耳蜗螺旋神经节细胞损伤并呈iNOS阳性表达,导致听力下降。
徐鸥,杨逸,路虹,薛丽华,郑春芳[10]（2004）在《脑神经生长素防护顺铂致耳蜗螺旋神经节损伤的研究》文中研究表明目的探讨脑神经生长素 （cerebralnervegrowthfactor,CNG）作为防护药物拮抗顺铂致耳蜗螺旋神经节毒性作用。方法选 2 4只豚鼠 ,随机分为 3组 ,每组 8只。顺铂组连续 5d腹腔注射顺铂 2mg/（kg·d） ;CNG组在给予顺铂前 2d开始大腿内侧肌肉注射CNG 2mg/（kg·d） ;正常对照组连续 5d腹腔注射生理盐水 2mg/（kg·d） ;用药前后测试听性脑干反应 （auditorybrainstemresponse ,ABR）阈值 ,处死动物制作耳蜗标本 ,应用透射电镜观察并用免疫组化法测定诱导型一氧化氮合酶 （inducednitricoxidesynthase ,iNOS）的表达。结果顺铂组动物ABR听阈值显着升高 ,透射电镜下见螺旋神经节细胞的细胞器损伤严重 ,iNOS阳性染色 ,呈棕黄色。CNG组动物ABR阈值略有升高 ,但较顺铂组为低 （P <0 .0 1）。螺旋神经节细胞的细胞器损伤较轻 ,iNOS显色浅 ,呈浅黄色。结论CNG可减少耳蜗iNOS表达 ,保护耳蜗螺旋神经节 ,从而保护听力
二、顺铂对耳蜗单离听觉细胞─氧化氮合酶表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、顺铂对耳蜗单离听觉细胞─氧化氮合酶表达的影响（论文提纲范文）
（1）听力保护活性化合物的筛选及其作用机制探究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 主要缩略词 |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 内耳毛细胞的结构与听觉的产生 |
| 1.1 内耳的结构与声音传导 |
| 1.2 内耳及耳蜗毛细胞的发育 |
| 第二节 耳毒性药物和噪声致聋 |
| 2.1 耳毒性药物及其分类 |
| 2.2 耳毒性药物引起听力损失的遗传机制 |
| 2.3 耳毒性药物在内耳中的代谢 |
| 2.4 最小化药物耳毒性的方法 |
| 2.5 氨基糖苷类抗生素诱发的毛细胞死亡及保护机制 |
| 2.6 噪声诱发的毛细胞死亡及保护机制 |
| 第三节 耳蜗毛细胞的药物保护研究 |
| 第二章 材料与方法 |
| 第一节 实验耗材与仪器 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 实验耗材 |
| 1.4 实验试剂 |
| 1.5 试剂配置 |
| 第二节 实验方法与技术 |
| 2.1 OC-1细胞体系实验 |
| 2.2 耳蜗组织培养实验 |
| 2.3 噪声性听力损伤模型实验 |
| 2.4 刺桐类生物碱的构效关系初探 |
| 第三节 统计学分析方法 |
| 第三章 结果与讨论 |
| 第一节 OC-1细胞中化合物活性筛选和鉴定 |
| 1.1 OC-1细胞中新霉素损伤条件的筛选 |
| 1.2 OC-1细胞中化合物活性的筛选和鉴定 |
| 第二节 组织培养中活性化合物的筛选和鉴定 |
| 2.1 组织培养中新霉素诱导耳蜗毛细胞损伤条件的筛选 |
| 2.2 组织培养中化合物对新霉素诱导小鼠耳蜗毛细胞损伤的保护作用 |
| 2.3 组织培养中Wech-1对新霉素诱导小鼠耳蜗毛细胞损伤的保护作用 |
| 第三节 Wech-1对噪声性听力损失及耳蜗毛细胞损伤的保护作用 |
| 3.1 Wech-1对110 dB噪声诱导的小鼠听力损失和毛细胞损伤的保护作用 |
| 3.2 Wech-1对100 dB噪声诱导的小鼠听力损失的保护作用 |
| 第四节 刺桐类生物碱的构效关系初探 |
| 第五节 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
| 作者简介 |
（2）葛根素对顺铂诱导小鼠耳毒性的防护作用研究（论文提纲范文）
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（3）A666多肽介导主动靶向隐形纳米粒对顺铂耳毒性预防作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 载地塞米松A666 多肽修饰隐形纳米粒的制备和表征 |
| 1.仪器和材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 材料和试剂 |
| 2.方法 |
| 2.1 A666 多肽修饰的载地塞米松的聚乙二醇聚乳酸纳米粒(DEX-NP)的构建 |
| 2.2 A666-DEX-NP的表征 |
| 2.3 A666-DEX-NP的体外释放特性 |
| 2.4 A666-DEX-NP的体内释放特性 |
| 2.5 统计学分析 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 A666-DEX-NP的表征及其理化性质的测定 |
| 3.2 A666-DEX-NP体外释放特性 |
| 3.3 A666-DEX-NP体内释放特性 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 A666-DEX-NP靶向性及抗顺铂耳毒性活性研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 1.1 主要仪器 |
| 1.2 材料和试剂 |
| 1.3 细胞和动物 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 A666-DEX-NP靶向性 |
| 2.2 A666 靶向纳米粒抗顺铂耳毒性活性研究 |
| 2.3 统计学处理 |
| 3.结果 |
| 3.1 A666-DEX-NP的靶向性研究 |
| 3.2 A666 靶向纳米粒抗顺铂耳毒性活性研究 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 A666-DEX-NP抗顺铂耳毒性及作用机制研究 |
| 1.仪器与材料 |
| 1.1 主要仪器 |
| 1.2 材料和试剂 |
| 1.3 动物 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 顺铂耳毒性动物模型的建立 |
| 2.2 A666 靶向纳米粒抗顺铂耳毒性 |
| 2.3 细胞内ROS水平测试 |
| 2.4 Western blot测定HEI-OC1 细胞中Cleaved-caspase-3和Bcl-2 表达水平 |
| 2.5 统计学处理 |
| 3.结果 |
| 3.1 听性脑干反应 |
| 3.2 毛细胞计数 |
| 3.3 细胞内ROS水平测试 |
| 3.4 Western blot测定HEI-OC1 细胞中Cleaved-caspase-3和Bcl-2 表达水平 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 顺铂耳毒性作用机制及抗氧化药物预防研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 攻读学位期间获得的专利、成果 |
（4）补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠耳蜗P38MAPK的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 主要符号表 |
| 前言 |
| 实验一 补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠听力及耳蜗形态学影响..3 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 观察指标及意义 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 实验二 补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠耳蜗P38蛋白的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 观察指标及检验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（5）顺铂耳毒性的研究（论文提纲范文）
| 1 顺铂对耳蜗形态学的影响 |
| 2 顺铂对耳蜗功能的影响 |
| 3 顺铂耳毒性的发生与发展 |
| 3.1 顺铂耳毒性的发生 |
| 3.2 顺铂耳毒性的发展 |
| 4 顺铂耳毒性的可能机制 |
| 5 对抗顺铂耳毒性措施的研究 |
| 6 监测顺铂耳毒性方法的研究 |
（6）二甲胺四环素对顺铂作用后耳蜗神经元中iNOS表达的影响（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 耳蜗基底膜分离 |
| 1.2 实验分组 |
| 1.3 免疫荧光染色 |
| 1.4 NO检测 |
| 1.5 免疫蛋白印记 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结 果 |
| 2.1 二甲胺四环素对顺铂引起耳蜗神经毒性的保护 |
| 2.2 二甲胺四环素对顺铂引起耳蜗组织中NO含量的影响 |
| 2.3 二甲胺四环素对顺铂引起耳蜗组织中iNOS表达的影响 |
| 3 讨 论 |
（7）川芎嗪防护顺铂耳毒性的实验研究（论文提纲范文）
| 一、中文摘要 |
| 二、英文摘要 |
| 三、符号说明 |
| 四、正文 |
| (一) 前言 |
| (二) 材料和方法 |
| (三) 结果 |
| (四) 讨论 |
| (五) 结论 |
| (六) 附表图 |
| (七) 参考文献 |
| 五、致谢 |
| 六、攻读学位期间发表的论文 |
（8）神经营养因子受体与顺铂诱导的耳蜗细胞毒性的相关性研究（论文提纲范文）
| 英文缩写词表 |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 顺铂中毒性耳聋的研究进展 |
| 第二节 神经营养因子及其受体的研究进展 |
| 第二章 药物性聋动物模型的建立 |
| 第一节 顺铂对活体大鼠耳蜗组织的毒性作用 |
| 第二节 顺铂对离体培养耳蜗组织的毒性作用 |
| 第三章 神经营养因子受体与顺铂诱导的耳蜗细胞毒性的相关性研究 |
| 第一节 神经营养因子受体在顺铂中毒大鼠耳蜗中的表达 |
| 第二节 p75 与caspase-3 在顺铂中毒大鼠耳蜗表达的关系及意义 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及取得的成果 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 致谢 |
（9）顺铂对耳蜗螺旋神经节细胞毒性作用及机制（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验动物。 |
| 1.2 听觉脑干反应 (auditory brainstem response, ABR) 测试。 |
| 1.3 透射电镜标本制作。 |
| 1.4 免疫组化测定i NOS表达。 |
| 1.5 显微图像分析技术。 |
| 1.6 统计学处理。 |
| 2 结果 |
| 2.1 动物的全身情况。 |
| 2.2 A B R听阈情况。 |
| 2.3 透射电镜观察。 |
| 2.4 i NOS活性表达。 |
| 2.5 i NOS平均灰度值分析。 |
| 3 讨论 |
（10）脑神经生长素防护顺铂致耳蜗螺旋神经节损伤的研究（论文提纲范文）
| 1 材 料 与 方 法 |
| 1.1 实验动物与分组: |
| 1.2 听觉脑干反应 (auditory brainstem response, ABR) 测试: |
| 1.3 透射电镜标本制作: |
| 1.4 免疫组化测定诱导型一氧化氮合酶 (induced Nitric oxide synthase, iNOS) 表达: |
| 1.5 显微图像分析技术: |
| 1.6 统计学处理: |
| 2 结 果 |
| 2.1 动物的全身情况: |
| 2.2 ABR听阈情况: |
| 2.3 透射电镜观察: |
| 2.4 免疫组化iNOS表达: |
| 2.5 显微图象分析: |
| 3 讨 论 |
四、顺铂对耳蜗单离听觉细胞─氧化氮合酶表达的影响（论文参考文献）
- [1]听力保护活性化合物的筛选及其作用机制探究[D]. 朱蔚杰. 东南大学, 2019(01)
- [2]葛根素对顺铂诱导小鼠耳毒性的防护作用研究[D]. 马婷婷. 锦州医科大学, 2019(01)
- [3]A666多肽介导主动靶向隐形纳米粒对顺铂耳毒性预防作用研究[D]. 汪雪玲. 上海交通大学, 2018
- [4]补肾聪耳方对庆大霉素致聋大鼠耳蜗P38MAPK的影响[D]. 朱丽军. 山西中医药大学, 2018(01)
- [5]顺铂耳毒性的研究[J]. 费文彬,江洋,吴展元. 听力学及言语疾病杂志, 2007(06)
- [6]二甲胺四环素对顺铂作用后耳蜗神经元中iNOS表达的影响[J]. 杜波,王苹,付涛,张岩,杜宝东. 中风与神经疾病杂志, 2007(04)
- [7]川芎嗪防护顺铂耳毒性的实验研究[D]. 韩明. 潍坊医学院, 2007(06)
- [8]神经营养因子受体与顺铂诱导的耳蜗细胞毒性的相关性研究[D]. 汤勇. 吉林大学, 2006(10)
- [9]顺铂对耳蜗螺旋神经节细胞毒性作用及机制[J]. 路虹,杨逸,徐鸥,张迪,韩海霞,于丽萍. 中国耳鼻咽喉头颈外科, 2004(06)
- [10]脑神经生长素防护顺铂致耳蜗螺旋神经节损伤的研究[J]. 徐鸥,杨逸,路虹,薛丽华,郑春芳. 河北医科大学学报, 2004(06)